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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

[求助] 关于RNA 已有2人参与

提取的RNA含量多少,可以进行CDNA的合成,以及进行后续的基因差异分析呢??
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

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感谢参与,应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-21 19:09:50
一般取决于你得反转录试剂盒,我用的是Takara的,要求是0.5pg-1ug,最好是达到0.5ug
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-21 16:16:08
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BioChen

银虫 (正式写手)

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NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-21 19:09:59
12孔板,就可以提取到约10ug RNA。第一次做,用6孔板或者35mm培养皿养细胞就可以了。
cDNA合成需要1-2ug RNA。
3楼2014-06-21 16:25:40
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 16:16:08
一般取决于你得反转录试剂盒,我用的是Takara的,要求是0.5pg-1ug,最好是达到0.5ug

是要达到至少500ng/ul吗?
4楼2014-06-21 16:54:18
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by BioChen at 2014-06-21 16:25:40
12孔板,就可以提取到约10ug RNA。第一次做,用6孔板或者35mm培养皿养细胞就可以了。
cDNA合成需要1-2ug RNA。

我提取的是植物的RNA
5楼2014-06-21 16:54:45
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 16:16:08
一般取决于你得反转录试剂盒,我用的是Takara的,要求是0.5pg-1ug,最好是达到0.5ug

跑电泳只能看到两条很弱的条带,5S的条带根本看不到
6楼2014-06-21 16:56:55
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
4楼: Originally posted by NSDSKY_LZM at 2014-06-21 16:54:18
是要达到至少500ng/ul吗?...

恩,这是最合适的
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
7楼2014-06-21 19:15:05
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

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引用回帖:
6楼: Originally posted by NSDSKY_LZM at 2014-06-21 16:56:55
跑电泳只能看到两条很弱的条带,5S的条带根本看不到...

说明你的浓度低,反转录不能好做,建议测一下OD吧,看看原液是多少浓度
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
8楼2014-06-21 19:15:56
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