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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于RNA
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)

[求助] 关于RNA 已有2人参与

提取的RNA含量多少，可以进行CDNA的合成，以及进行后续的基因差异分析呢？？
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1楼 2014-06-21 15:33:45
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-21 19:09:50
一般取决于你得反转录试剂盒，我用的是Takara的，要求是0.5pg-1ug，最好是达到0.5ug
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-21 16:16:08
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-21 19:09:59
12孔板，就可以提取到约10ug RNA。第一次做，用6孔板或者35mm培养皿养细胞就可以了。
cDNA合成需要1-2ug RNA。
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3楼2014-06-21 16:25:40
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 16:16:08
一般取决于你得反转录试剂盒，我用的是Takara的，要求是0.5pg-1ug，最好是达到0.5ug

是要达到至少500ng/ul吗？
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4楼2014-06-21 16:54:18
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by BioChen at 2014-06-21 16:25:40
12孔板，就可以提取到约10ug RNA。第一次做，用6孔板或者35mm培养皿养细胞就可以了。
cDNA合成需要1-2ug RNA。

我提取的是植物的RNA
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5楼2014-06-21 16:54:45
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NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 16:16:08
一般取决于你得反转录试剂盒，我用的是Takara的，要求是0.5pg-1ug，最好是达到0.5ug

跑电泳只能看到两条很弱的条带，5S的条带根本看不到
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6楼2014-06-21 16:56:55
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
4楼: Originally posted by NSDSKY_LZM at 2014-06-21 16:54:18
是要达到至少500ng/ul吗？...

恩，这是最合适的
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
7楼2014-06-21 19:15:05
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by NSDSKY_LZM at 2014-06-21 16:56:55
跑电泳只能看到两条很弱的条带，5S的条带根本看不到...

说明你的浓度低，反转录不能好做，建议测一下OD吧，看看原液是多少浓度
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
8楼2014-06-21 19:15:56
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