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baiqiao126

铜虫 (初入文坛)

[求助] HEPG2细胞传代后48小时培养基就变浑浊 已有2人参与

前些天复苏了HEPG2细胞,细胞生长缓慢,以前是1:6传代3天就铺满,现在1:4传代也要5天铺满,传到第三代时做了MTT实验摸种板密度,发现吸光度特别大。
        重新复苏了 细胞,贴壁不错,但是传了一代后,48小时发现培养液浑浊。当时怀疑是做MTT的时候枪头污染了。把枪头重新高压灭菌了,PBS,培养基,胰酶全部换了新的,在培养箱里单独孵了PBS,培养基,也是清澈的。
        又重新复苏了细胞,跟上次一样,还是当时贴壁不错,传了一代后,48小时发现培养基上面有一层雾状薄膜,但是当时显微镜下细胞贴壁不错,我就换了一次液,换液后第二天就发现培养基仍然有雾状薄膜,但是这回细胞死亡了,未漂浮,但是已经看不见细胞本身了,显微镜下观察底层是大片黑色圆点。
求助各位,可能的原因。不胜感激!
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1281678813

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

HepG-2 细胞培养
    本人最近在养HepG-2 细胞,之前的细胞形态都挺饱满的,可是最近,一方面传代后细胞贴壁,但是形态狭长,不饱满;另一方面细胞培养液表面总有漂浮物,感觉是死细胞,但是又不肯定,其他人也有出现这种情况,后来打扫过之后还有。
    恳请各位高手指点,不胜感激!
4楼2014-07-10 11:13:35
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
支原体污染了,可以考虑试试支原体清除试剂。
2楼2014-06-18 09:21:32
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