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测定DNA浓度的方法
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请高手指点，如何测定DNA浓度？质量？比如：1ul的样品中含有多少ng的DNA？1ul的样品中含有多少pmol的DNA？ 谢谢了！ [search]DNA浓度[/search] |
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5楼2008-03-25 19:11:34
3楼2008-03-25 13:38:16
lujie198x
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 28.8
- 帖子: 123
- 在线: 11.5小时
- 虫号: 463721
- 注册: 2007-11-20
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
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reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 关注,.
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DNA纯度和浓度的检测:分光光度(紫外吸收)法 1.预热紫外分光光度计10-20分钟。 2.取所需的比色杯（4ml），其中一只装入3 mlH2O溶液，作为空白液，用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。 3. DNA纯度及浓度的测定： ①取3微升的DNA样品加入比色杯，加dH2O至3000微升，混匀。 ②将比色杯置入分光光度计中，调入射光波长，分别用空白溶液调整零点（T为100，OD为0），测待测样品在260nm、280nm、230nm的OD值。 ③计算浓度： DNA浓度（ug/ml）=A260×50ug/ml×稀释倍数 对于双链DNA 1.0 OD260=50 ug/ml 对于单链RNA 1.0 OD260=40 ug/ml 4. 纯的DNA溶液其OD260/OD280应为1.8，OD260/OD230应大于2.0。 ⑴ OD260/OD280大于1.9时，说明有RNA污染，小于1.6时表明有蛋白质或酚污染。 ⑵ OD260/OD230小于2.0时，表明溶液中有残存的盐和小分子杂质，如核苷酸、氨基酸、酚。 |
4楼2008-03-25 16:06:30
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