24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 150  |  回复: 2
当前主题已经存档。

lovebaby

铜虫 (小有名气)

[交流] 求教关于cDNA反转录的问题

我用INTRIVOGEN 的TRIZOL 提取植物总RNA,RNA 质量挺好,跑电泳显示18S、28S两条带很清晰,也没有杂带,接着用M-MLV反转录酶做反转录,RNAinhibitor做抑制剂, 合成第一连后再用RNaseH DNA 聚合酶I合成CDNA 双链 ,用氯仿抽提一次,跑电泳显示并不是弥散的带  而是有两条类似与RNA 的主带,真搞不清楚是怎么回事了,请高手指教啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻5飞扬

金虫 (正式写手)

呵呵,估计因为18S和28S的RNA本身量多,因而反转的量也比较大,如果点样量大点会不会出现弥散的带啊.不过不清楚你要做什么,如果不是很高要求的话,我们只做反转得到第一链然后就直接用PCR拿自己的基因了.如果你要做一些筛选什么的,是不是应该提总的mRNA更为合适
2楼2008-03-24 20:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovebaby

铜虫 (小有名气)

恩 谢谢楼上  我想筛选差异表达基因, 是不是我减少反转录的摸版量会比较好一些呢?我的RNA 量与OLIGODT是2:1的关系. 我需要用CDNA双链进行酶切,以前有人做过是用总RNA 的,图片是弥散的带,可是我不知道他的具体方法是不是和我的一致
3楼2008-03-26 09:19:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lovebaby 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 青春裁为三截 2026-03-29 4/200 2026-03-29 15:01 by 唐沐儿
[考研] 309求调剂 +7 谁不是少年 2026-03-29 7/350 2026-03-29 13:17 by mumin1990
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +9 芋泥小铃铛 2026-03-28 9/450 2026-03-29 11:46 by longlotian
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
信息提示
请填处理意见