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z-w-p

新虫 (初入文坛)

[交流] pUC57能在酿酒酵母里面复制么?

如题,请问pUC57能在酿酒酵母里面复制么?

我合成了一段序列在pUC57上面,序列是我改造后的基因和基因上下游的同源臂。然后我把连有序列的pUC57转酿酒酵母做同源重组,筛选到了转化子,挑单菌落培养后体基因组PCR得到的结果是既有原始基因大小的条带,又有改造后基因大小的条带(改造后基因要比原始的大500bp左右)。所以就怀疑是不是pUC57在酿酒酵母里面自行复制,使得没有发生整合的情况下,得到这样的结果。PS:基因在基因组上只有一个拷贝。

请问了解的人不吝赐教。谢谢!
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2楼2014-06-08 22:52:48
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不会的,酵母表达中利用的载体可以分自我复制型和整合型,自我复制型在毕赤酵母中一般不会见到(起码我没见有人用过),因为它及其不稳定,这类的载体一本需要在质粒上有酵母的ARS序列,pUC57显然不会存在这个序列,所以这种质粒只会发生整合
3楼2014-06-26 10:39:20
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xissy

铜虫 (小有名气)

请问你的pUC57能交换吗?
4楼2014-10-29 17:08:32
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