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keennes木虫 (著名写手)
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[求助]
用渗透压冲击法得到的蛋白需要变性复性吗?大肠杆菌表达的是caspase类蛋白。
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见图,1为对照;2为诱导后的菌体,其他为冲击样品。红箭头所示为目的蛋白之一。3中冲击出来的目的蛋白最多,且明显比较黏。30摄氏度,表达过夜,表达量很高,但是没有检测到活性。从图中也可以看出来,有活性的目的蛋白应该是把自己切成两条。电泳应该能看到三条带的,现在只有一条,且没有活性。请问,这种情况需要变性复性吗?该如何操作?大肠杆菌表达新手,谢谢大家的帮忙。 未标题-1.png |
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