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perennials

金虫 (正式写手)

[求助] 益生菌传代 已有2人参与

进行益生菌包埋,每次实验需要使用菌液,但是实验间隔要1-2周之久,
希望初始的菌数和活力能基本相同,这样结果才有可重复性。但是菌液保存不知道怎么处理,希望有经验的大侠赐教。
由于担心把菌液放在MRS培养基里4度保存,连续传代,时间会比较长导致每次的菌数不一致,
因此将菌液和甘油一起冻在-20度,每次都取相同的体积接种,活化同样的代数后使用,但也感觉明显活力数量不一致。
该怎么办呢,有同样做益生菌包埋的吗?如何处理这一问题?谢谢。
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fenghuwuyu

木虫 (正式写手)

懒

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-06-06 17:55:49
perennials: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-06-07 10:17:15
这个就没有办法了 只能保证每次使用的菌种代数相同、培养条件相同、接种量相同 1.你可以活化一个一代 然后接种二代、三代 用三代来做实验 下次做的时候用上次的一代继续活化 保证每次活化条件一致(活化时间、培养基、温度) 2.你也可以将菌体做成菌粉 每次使用的时候取相同量菌粉来活化至三代
信不信由你
2楼2014-06-06 13:16:01
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
perennials: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-07 10:17:09
冻存第I代。每次都取出来用第III代。连续传代肯定不行。活力数量不一致应该是操作的问题。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
3楼2014-06-06 22:16:29
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perennials

金虫 (正式写手)

好的,谢谢,现在是活化3代后使用的,感觉不同的只可能是每次培养基配制时的微弱差异(配方相同)和培养时间不是那么正好,可能是操作问题,我再实验看看。
4楼2014-06-07 10:23:46
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