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concon123456

铜虫 (小有名气)

[求助] B16细胞变性形却不分裂怎莫办? 已有1人参与

如题:我养的B16细胞复苏后 细胞成活的不多,但是一部分细胞变形了,纤维状的,可就是不分裂啊,上次复苏的细胞也是这样,慢慢就变圆死掉了,请哪位大侠指点一下!急!用的是DMEM培养基10%四季青的新生牛血清。用Gibco的胎牛也复苏过,都这样。
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concon123456

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-06-04 08:26:26
污染了。
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 μm)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献 ...

谢谢你的回答,我也曾经怀疑过是支原体污染,根据网友建议和实验室条件用卡那霉素50ug/ml试过,细胞还是死了。还没敢跟老板说这件事,试剂是买不了的。
3楼2014-06-04 15:09:03
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
concon123456: 金币+30, 有帮助 2014-06-04 15:09:32
污染了。
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 μm)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明:当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
    吉锐生物根据自身的经验开发了MycoplasmaOUT™,用于解决因支原体污染而导致细胞污染或状态下降的问题,同时其对于见的革兰氏阴性和阳性菌也有一定的清除作用。从而确保研究人员的研究结果真实、可信。
2楼2014-06-04 08:26:26
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yipan

铜虫 (职业作家)


引用回帖:
3楼: Originally posted by concon123456 at 2014-06-04 15:09:03
谢谢你的回答,我也曾经怀疑过是支原体污染,根据网友建议和实验室条件用卡那霉素50ug/ml试过,细胞还是死了。还没敢跟老板说这件事,试剂是买不了的。...

试剂买不买的没有什么关系,重要的是实验要做好啊。你的这种B16细胞可惜我们没有,要不我就送一瓶给你了。你的实验室条件是不是不太好啊,还有培养箱是不是要清理一下啊,灭灭菌再放细胞进去啊。
4楼2014-06-04 15:25:18
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concon123456

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yipan at 2014-06-04 15:25:18
试剂买不买的没有什么关系,重要的是实验要做好啊。你的这种B16细胞可惜我们没有,要不我就送一瓶给你了。你的实验室条件是不是不太好啊,还有培养箱是不是要清理一下啊,灭灭菌再放细胞进去啊。...

其他细胞都好,培养箱清理的还算比较及时的。把细胞养死了这种事真是太丢人了╮(╯▽╰)╭细胞没有,别的实验都是免谈啊,发愁。
5楼2014-06-05 22:11:00
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