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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助！新人，融合PCR一直融不上！！！
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luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 571900696 at 2014-06-09 10:15:41
重新换了引物后一下子就p出来单独的片段了，但是融合不上。。...

再摸索下条件应该差不多了
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大家相互帮助哈
21楼2014-06-09 19:36:20
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糊涂糊涂

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-23 20:30:30
Taq酶的保真性不太好吧，我用pfu酶，20ul体系融合后基因插入很多。你换个体系，换一种酶试试
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22楼2014-06-25 11:05:22
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571900696

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 糊涂糊涂 at 2014-06-25 11:05:22
Taq酶的保真性不太好吧，我用pfu酶，20ul体系融合后基因插入很多。你换个体系，换一种酶试试

现在换了一个高保真酶，已经融上啦，十分感谢！
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23楼2014-06-26 10:51:44
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prominetsun

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by purRRRRRRRRR at 2014-06-03 23:05:48
你这pcr条带跑的也太难看了，我就没见过这么难看的条带，容不出来就对了。2000多bp的不能用taq酶了，必须用高保真的酶，这么简单的事情，难道你师兄没告诉过你吗？
...

看到你的回复，我都笑抽了。。。。对了，我一会儿也放上一个电泳条带图，你也帮忙看看分析下原因吧
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24楼2014-08-22 23:47:15
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sophia7168

新虫 (初入文坛)
求问楼主，我现在第三轮一直融合不上，楼主第二轮用的什么反应条件什么体系？

发自小木虫IOS客户端
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25楼2016-04-27 16:50:45
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