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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 心肌细胞转染质粒的选择：
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华农夏田

铁虫 (正式写手)

[交流] 心肌细胞转染质粒的选择： 已有4人参与

大家做转染心肌细胞选择哪个质粒呢？PC3.1，PCMV？我选的IRES2，还没尝试过，不知可行否？N1空载转染倒是真不错！
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要科研也要生活
1楼 2014-06-02 10:59:26
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MarchZR

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看你是瞬时转染还是稳定转染了
pCMVp-NEO-BAN载体
如果是构建稳定细胞系，该载体可用G418筛选，较好
pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体(Enhanced Fluorecent Protein Vector)
该表达载体EGFP上游有Nde1、Eco47111和Age1克隆位点，将外源基因扦入这些位点，能够实现外源基因在细胞内的表达和/或组织中的定位
pSV2、CMV4 表达载体
此载体不含neo基因，不能用来筛选稳定细胞株。
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11楼2015-11-05 10:27:25
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miao1991

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2014-06-02 12:42:36
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燕绮

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我是来mark学习的~~
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3楼2014-06-02 21:33:43
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华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by miao1991 at 2014-06-02 12:42:36
看你做什么实验啊，表达用3.1，观察用n1

就是心肌细胞外源蛋白转染，异位表达！选的Lipo LTX，文献都是用3.1，我看IRES2有脑心肌炎病毒位点就选了IRES2质粒，要是IRES2表达不行的话，毕业就有点危险了！不过该质粒转染一般的细胞系是没问题的，关键是它能共表达GFP，不然我也不选它了！我用的control是N1，N1转进去效率蛮高的！
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要科研也要生活
4楼2014-06-03 09:35:40
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