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liumikewolf金虫 (小有名气)
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[交流]
[color=Blue]pet28a（请大家帮助）[/color]
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问题一：抗生素抗性基因是否也需要表达系统元件来实现转录翻译，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号？如果需要的话，那么克隆载体也是有表达系统元件？我问这个的原因：我用PCR克隆质粒载体中的卡那抗性基因，用T载体连接转化DH5a，那这个抗性基因能否在DH5a中得到表达？ 问题二：现在我在进行pET28转化DH5a试验。20ug/ml平板能得到转化子,但是挑选多株转化子液体培养，24h菌液浑浊，继续培养，菌浓OD始终较低，取1.5ml离心提取质粒，结果均为阴性。这是什么原因? 问题三：可否有虫友可以提供pet28a，与我现有的质粒pet28a做个对比试验？可以提供其他质粒来交换！ [search]pet28[/search] |
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2楼2008-03-20 17:55:49
