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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hanketing

新虫 (初入文坛)

[交流] 植物基因组Southern杂交

连续做了几次转基因植物的Southern杂交鉴定无果后,求助站内的朋友。
这批转基因植物做过PCR和PCR-Southern 检验,都呈阳性,可是Southern 杂交每次都做不出来。最近一次是昨天,只有一个隐约能看到一点带。我用的是罗氏的地高辛标记试剂盒Ⅰ,站内哪位朋友做过相关的试验,而且有比较成熟的经验能给我分享一下。我这实在是着急,就指着这片子毕业呢。各位朋友也可以指出这个试验中最有可能出现的问题,以便我在以后的试验中进行改进。如果有成熟的试验流程,希望能发到我的邮箱,不胜感激!
hanketing@126.com
[search]Southern[/search]
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hanketing

新虫 (初入文坛)

那DNA的质量和浓度有什么要求吗?
3楼2008-03-20 07:46:31
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reasonspare

木虫 (著名写手)

bloting,中,有好多经验的成分,即便大家告诉你,但是我想都是一个版本的,没有什么特殊的过程,

预试验

\验证探针的有效性,和有效浓度.

梅切,
电泳,
转膜
铰链固定,
洗膜
染色]
显色,
拍照..

每一个都是关键,但大家手上的protocol 几乎一样, 就是不同的操作习惯,不一样,
就算告诉你了,也不一定做出来,真的.

最好的办法就是,请人帮你做一张, 你在旁边从头到尾的看一下, 你以后就很快成为blotting 的高手了.哈哈哈
另外也有公司提供服务,甚至可以联系让客户在旁边观摩.哈哈哈哈哈
仅供参考.
大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
2楼2008-03-20 02:56:08
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