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T载体连接问题,急求!
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playboy723
金虫
(正式写手)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 783.3
帖子: 352
在线: 43.3小时
虫号: 344753
注册: 2007-04-14
性别: GG
专业: 遗传学和分子生物学
呵呵 T载体出现自连说明2个问题
1:载体有问题 正常情况下T载体是不可能自连的
2:你的PCR产物没有纯化 反应中剩余的dATP干扰了T载体的连接
解决方法
1:换高保真的Taq酶 且末端要带A的
2:PCR产物纯化后再连
3:连接时间可延长些 不超过半小时为宜
你试试吧
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11楼
2008-06-12 21:45:02
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