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playboy723

金虫 (正式写手)

呵呵  T载体出现自连说明2个问题
1:载体有问题     正常情况下T载体是不可能自连的  
2:你的PCR产物没有纯化   反应中剩余的dATP干扰了T载体的连接
解决方法
1:换高保真的Taq酶   且末端要带A的  
2:PCR产物纯化后再连
3:连接时间可延长些  不超过半小时为宜
你试试吧
11楼2008-06-12 21:45:02
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