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leezz

铜虫 (小有名气)

愤青

[交流] 大肠杆菌冻融一次后出现了鼻涕状的状态

大家好:
     最近试验中,本来样品保存在-80度中,由于停电的原因,中间一天放置在4度冰箱中,然后放回-80度中保存。在后续的重组蛋白纯化中,目的蛋白一次比一次含量减少,而且减少量很大。整个纯化工艺不变,而整个过程中菌体重悬时出现了类似鼻涕状的粘稠物质,不知道菌体发生了怎么样的变化,求赐教,谢过了。
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璧月

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引用回帖:
41楼: Originally posted by sqd767019087 at 2014-06-16 21:11:28
因为冻融一次后有些菌就会破了,里面的DNA出来所以变得很黏。 你可以用点DNA酶消化掉

我现在是把菌攒几次一起用裂解液悬浮,上次和这次的菌在同一个离心管里,这样就要反复冻融。
会不会出现目的蛋白溶入上清的情况?
44楼2014-10-15 08:34:25
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