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每题10金币，请虫友们回答时标清题号！ 1. 把正常的对卡那敏感的细菌涂在含有卡那的培养基上，长出来的菌落是已经突变成抗那的细菌。怎样区别它们是能在不含有卡那霉素的培养基上生长的抗卡那霉素的细菌（非卡那依赖型）还是只能在含有卡那的培养基上生长的抗卡那的细菌（卡那依赖型）？假定这些突变是非卡那霉素依赖型，又怎么样证明抗卡那的突变是发生在质粒上，是发生在染色体上还是质粒和染色体都发生了突变。 2. 体内转录与体外转录有什么不同，设计一个体外转录的实验方案 3. 含有卡那抗性基因的某质粒的复制是温度敏感型的，将它转化到对卡那敏感的大肠杆菌中，培养几代后，将十的七次方个细胞涂到含卡那的培养基上，四十二度培养，得到五十个菌落，请解释这些菌落出现的可能机制。 4. 有两个DNA样品，具有相同的分子量及GC百分含量，但是在CsCl梯度离心时，发现一条DNA带要比另一个带宽几乎两倍，请解释此现象。如果加入放线菌素D，将会如何影响这个DNA样品的梯度离心密度外形？ 5. PBR322和PUC质粒使用了相同类型的复制子，但是前者在宿主内有 15-20考贝，后者可高达500-700为什么有两个基因在同一个转录信号的刺激下得到表达，合成两个蛋白，在移动转录信号后，其中一个的蛋白合成速率没有发生太大变化，另一个蛋白的合成几乎停止，请解释。 6. 将一个蛋白内部的丙氨酸变成缬氨酸，发现这个蛋白的活性丧失。但是当进行第二个突变，将另一个位置的异亮氨酸变为甘氨酸，活性又恢复。这个突变是如何导致活性的恢复？ 7.用PCR产物走胶，出现四条带，长度比为1:2:3:4,从胶上切下最长的带做模板，再用同引物做PCR，发现又同样出现四条带。这个被编码的蛋白可能是什么样的结构？ [ Last edited by weiweiyu_22 on 2008-3-26 at 09:32 ] |
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weiweiyu_22(金币+30,VIP+0):考试已经结束了，答案来得晚了点，不过还是非常感谢，回答得非常到位！
weiweiyu_22(金币+30,VIP+0):考试已经结束了，答案来得晚了点，不过还是非常感谢，回答得非常到位！
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1) 第一问的实验如下： 含卡那 不含卡那 菌类型 + — 卡那依赖性 + + 非卡那依赖性 第二问：将非卡那霉素依赖型中的质粒提出，转染到对卡那敏感的细菌中，如果在含卡那的培养基上生长，则质粒突变；如果在卡那的培养基上不生长，则染色体突变；质粒转染到卡那依赖性的细菌中，如果在不含卡那的培养基上生长，则质粒和染色体都发生了突变。 3) 卡那抗性基因的某质粒转染到卡那敏感的大肠杆菌得到卡那抗性菌； 卡那敏感的大肠杆菌中质粒自发突变成为质粒的复制温度不敏感型菌； 十的七次方个细胞得到五十个菌落，概率是十的六次方分之一，符合同源重组的概率；因此使上述的两个菌中的质粒发生同源重组，产生了既有卡那抗性，又是温度不敏感的菌。 4)CsCl梯度离心时，发现一条DNA带要比另一个带宽几乎两倍,说明正在进行转录.放线菌素D实验上用来抑制依赖于DNA的RNA合成。即与模板DNA中的鸟苷基结合而阻抑基于RNA聚合酶的转录。因此,加入放线菌素D后,抑制转录,带将变窄. 5) PUC质粒是强启动子；合成几乎停止的蛋白只受一个转录信号信号调控；合成速率没有发生太大变化的蛋白受多重信号的调控。 6) 原来的蛋白中，丙氨酸（强极性）同异亮氨酸（弱极性）依靠足够强的范德华力相互吸引形成催化中心；当丙氨酸（强极性）变成缬氨酸（弱极性），缬氨酸（弱极性）同异亮氨酸（弱极性）之间的范德华力很弱，不能充分形成催化中心；当异亮氨酸（弱极性）变为甘氨酸（强极性），缬氨酸（弱极性）同甘氨酸（强极性）再次依靠足够强的范德华力相互吸引形成催化中心，蛋白活性恢复 7) 蛋白上可能有四个相同的结构域，也可能是由四个相同的亚基构成。 |
13楼2008-03-26 01:38:05
2楼2008-03-19 10:35:54
lauren180
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