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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » [请教]蛋白质的紫外吸收问题
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haosz

银虫 (初入文坛)

[交流] [请教]蛋白质的紫外吸收问题

我的BSA蛋白溶液在210nm左右吸收值总是比文献中的高很多,甚至可以达到 4,请问什么原因可以引起这种现象,怎样解决?有可能是BSA纯度不够引起的吗
[search]光谱[/search]

[ Last edited by dnp on 2008-3-18 at 09:55 ]
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1楼 2008-03-18 09:49:13
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yulan19992002

至尊木虫 (知名作家)
是不是牛血清白蛋白浓度太大了？
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2楼2008-03-18 11:29:33
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yensh

金虫 (文坛精英)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by yulan19992002 at 2008-3-18 11:29:
是不是牛血清白蛋白浓度太大了？

我也考虑到这一点！
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ID已经更换，此ID作废
3楼2008-03-18 11:31:29
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haosz

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yulan19992002 at 2008-3-18 11:29:
是不是牛血清白蛋白浓度太大了？

是和文献中BSA浓度相同的情况下进行比较的,不知道为什么差那么多
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4楼2008-03-18 13:56:58
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catalysthua

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by haosz at 2008-3-18 13:56:

是和文献中BSA浓度相同的情况下进行比较的,不知道为什么差那么多

你的溶剂用的什么？溶剂很重要的，和文献里的一样嘛吗？
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5楼2008-03-18 23:37:26
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catalysthua

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by catalysthua at 2008-3-18 23:37:


你的溶剂用的什么？溶剂很重要的，和文献里的一样嘛吗？

补充一下，可能本人和你不是一个专业的，所以太专业的词汇不会说，呵呵
但是从我的试验经验来看，不同的溶剂下测的吸光度是不同的。今天刚做了实验得出的结论
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6楼2008-03-18 23:40:12
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hd1113

木虫 (小有名气)
扣除你所用溶剂的背景吸收，水中不要加碳酸盐或者碳酸氢盐，如果加了一定要扣除背景吸收
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7楼2008-03-19 10:36:44
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haosz

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by catalysthua at 2008-3-18 23:37:


你的溶剂用的什么？溶剂很重要的，和文献里的一样嘛吗？

和文献中的溶剂是一样的,是由Tris和HCl配制的缓冲溶液,酸度和浓度都是一样的,而且空白已经扣除了,结果还是很高

[ Last edited by haosz on 2008-3-19 at 14:27 ]
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8楼2008-03-19 14:26:08
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prime2004

仪器肯定没问题吗？你用的是什么仪器，在210nm有些仪器杂散辐射会比较大，也可能增加测量误差
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9楼2008-03-20 08:39:06
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haosz

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by prime2004 at 2008-3-20 08:39:
仪器肯定没问题吗？你用的是什么仪器，在210nm有些仪器杂散辐射会比较大，也可能增加测量误差

Cary500的紫外,应该没有问题吧
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10楼2008-03-20 09:01:06
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