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真菌基因敲除
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| 我做丝状真菌的基因敲除，请问同源臂设计多长比较合理 ？最近做的原生质体转化颗粒无收，在做酶解 时我还镜鉴，感觉原生质体做的还好，但在平板上却颗粒无收，怎么回事呢？用的也是复苏培养基。大家说有没有可能原生质体对抗生素有特定的敏感度？也就是说原始菌株对该抗生素的最低敏感度和被制成原生质体后对该抗生素的敏感度不同？我现在也搞不清楚了。人家都有作出专利的来了，我都搞了这么长时间了，不知道到底哪里出了问题，即使没有同源整合的，总该的有个随机整合的嘛。再说验证也是格问题，还得研磨提染色体，我觉得工作量很大，大家有什么更好的方法没呢？谢谢你们的宝贵意见，期待中。。 |
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