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applezhao

金虫 (小有名气)

[求助] 求助western 已有10人参与

大家好,我最近在做western,遇到一些问题,求助。
我们实验室的转印仪是bio-rad公司的半干式的,但是我做了几次都做不出来结果,电流刚开始可以达到设定的数值,过两分钟就下降了,同学说可能是电转移缓冲液的问题,我现在用的配方是Tris 3.0g,SDS 1.0g,Gly 14.4g,甲醇200ml,加双蒸水定容至1000ml。这个配方是湿转的,请问这个配方能用于半干转吗?如果不能用的话,半干式配方应该是什么?谢谢哦
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命里有时终须有,命里无时莫强求
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

半干转:
Glycine/甘氨酸(分子量75.1)         2.93g(39mmol)
Tirs(分子量121.14)                   5.81g(48mmol)
10%SDS                            3.75ml(1.3mmol)
加水溶解后定容至800ml,加200ml甲醇,混匀

转膜时如果恒压转,电流是变化的;如果横流转,电压是变化的,这个没什么关系。
42楼2014-05-25 22:52:09
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假大空

木虫之王 (文学泰斗)

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10楼2014-05-21 20:58:42
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