应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 反相色谱 平稳段（洗出段）梯度峰如下降低或消除？
172/2返回列表上一页12
查看: 2145  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
foxcl(News代发): 金币+1, 感谢回帖交流 2014-05-22 23:58:58
你的缓冲盐浓度比较高，pH3.0:乙腈（1:9）会不会有盐析出，如果盐的浓度对分离没太大影响，可以降低浓度（5mmol可以试试）。梯度漂移很常见，引起原因一般是试剂质量不好、管路过滤装置需清洗和混合器混合效果不好、较脏的柱子、检测器光路老化能量不够等，不如你先用根新柱子试试。
赞一下 回复此楼
快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
11楼2014-05-21 09:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pipwang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
“梯度鬼峰”呀
不好消除，因为检测波长210nm，乙腈在210附近有吸收，流动相中乙腈浓度的改变肯定会引起基线的波动
赞一下 回复此楼
12楼2014-05-21 11:30:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

axearmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
foxcl(News代发): 金币+1, 感谢回帖交流 2014-05-22 23:58:32
foxcl: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-05-25 16:02:01
此为磷酸盐的杂质洗脱峰，为多种杂质在色谱柱中富集，达到一定有机相比例后集中洗脱所致
解决办法：
1.提高梯度起始有机相比例，减少低有机相比例平衡时间。可有限地减小峰高峰面积。
2.采用纯度级别较高的缓冲盐试剂。一般来说，磷酸二氢钾要比磷酸二氢钠杂质少一点。当然，有条件建议使用UG或HPLC级的缓冲盐。
3.梯度放缓可以选择性避开待检测物质，但不能消除杂峰，甚至可能使杂峰变大。
赞一下 回复此楼
13楼2014-05-21 16:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by kf1009 at 2014-05-21 09:28:26
你的缓冲盐浓度比较高，pH3.0:乙腈（1:9）会不会有盐析出，如果盐的浓度对分离没太大影响，可以降低浓度（5mmol可以试试）。梯度漂移很常见，引起原因一般是试剂质量不好、管路过滤装置需清洗和混合器混合效果不好、 ...

不是柱 的问题，目前极有可能是分析纯的磷酸盐的问题  已经订购色谱级的    等到货后测试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
14楼2014-05-25 15:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by kf1009 at 2014-05-21 09:28:26
你的缓冲盐浓度比较高，pH3.0:乙腈（1:9）会不会有盐析出，如果盐的浓度对分离没太大影响，可以降低浓度（5mmol可以试试）。梯度漂移很常见，引起原因一般是试剂质量不好、管路过滤装置需清洗和混合器混合效果不好、 ...

已经浓度最高70   不会析出的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
15楼2014-05-25 15:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by pipwang at 2014-05-21 11:30:37
“梯度鬼峰”呀
不好消除，因为检测波长210nm，乙腈在210附近有吸收，流动相中乙腈浓度的改变肯定会引起基线的波动

有部分是梯度峰，但有几个和主成分峰重合，不管怎么调都有     调完也是和主峰高度重合   可能是杂质的影响的问题

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
16楼2014-05-25 16:00:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by axearmy at 2014-05-21 16:57:44
此为磷酸盐的杂质洗脱峰，为多种杂质在色谱柱中富集，达到一定有机相比例后集中洗脱所致
解决办法：
1.提高梯度起始有机相比例，减少低有机相比例平衡时间。可有限地减小峰高峰面积。
2.采用纯度级别较高的缓冲盐 ...

起始梯度不能再高了！

现在正在排除磷酸盐杂质的影响

梯度不能太缓   不然系统没法走了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
17楼2014-05-25 16:23:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 foxcl 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜吗？ +12 布布和一二 2026-08-19 13/650 2026-08-19 14:33 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +8 ziyangfang 2026-08-19 9/450 2026-08-19 13:08 by blacksandy
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +8 kkkl_v 2026-08-19 8/400 2026-08-19 12:34 by Vivilian
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭