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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助关于转化
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 求助关于转化

目的基因转化到宿主菌，经抗性筛选后，再通过PCR验证，为什么PCR的条带非常的弱？PCR的条件与原始基因PCR的一样！这是否算转化成功？一般前后PCR的条件是否是一样的？还是后者的条件还要摸索？谢谢
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1楼 2008-03-16 21:52:14
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booksworm

铜虫 (小有名气)
你是否可以通过提取质粒然后酶切的方法证明你的目的基因已经转化了
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4楼2008-03-18 10:51:10
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来
你在做PCR是有没有阳性对照。按理说转化后进行PCR产物量应该很多，因为你的载体是高拷贝，所以目的基因也是高拷贝。但你的PCR产物少，是不是PCR体系有问题？如果引物一样的话，反应参数应该是一样的。
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细推物理须行乐。
2楼2008-03-16 22:03:56
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clf0803

银虫 (正式写手)
谢谢楼上，欢迎大家多给我出主意！
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3楼2008-03-17 08:30:11
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