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liudaochuang

金虫 (小有名气)

[交流] 麻烦大家帮我分析一下TLC是怎么回事

微生物发酵液在pH3.0用乙酸乙酯萃取后上薄层,下面是我的TLC图,展开条件是石油醚:乙酸乙酯=2:1,GF254板,荧光图上的黑色长带都是活性物质,为什么会爬的那么弥散,点样孔处有一批东西基本没有展开(可以排除过载),试了很多展开体系和条件都是这样(目标物质是未知物,只知道是芳香类),请问大家,这样的图是正常的吗?有哪类物质可能出现这样的TLC图?能够全面回答我的问题的赠送3-5个金币。

[ Last edited by liudaochuang on 2008-3-15 at 10:04 ]
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红橙子

银虫 (正式写手)


liudaochuang(金币+1,VIP+0):可以试试,谢谢!
有些脱尾,你试过其他展开体系吗?比如氯仿甲醇体系。我用石油醚乙酸乙酯如果托尾就会考虑氯仿甲醇体系,按照极性你可以试试氯仿比甲醇10:1,15:1,20:1。
还有点样的时候不要太浓了。
愚见
2楼2008-03-15 10:39:40
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snower976

银虫 (初入文坛)


liudaochuang(金币+1,VIP+0):不是拖尾,右边是点样处,是根本就没有分离度,试了很多条件都这样
是不是展开剂的极性太小了,试试配大一点
带有酸性物质也会拖尾,用K2CO3或饱和食盐水洗一下试试
3楼2008-03-15 10:53:46
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jingjingkitten

铜虫 (小有名气)

★ ★
liudaochuang(金币+2,VIP+0):已经可以排除过载,所要分离的是未知物,只知道是酚酸类的物质,还是很感谢你!
调整下展开剂的比例,把乙酸乙酯的比例调高点尝试下呢?另外,我还是怀疑是否是过载,上样量尽量不要多于10uL,还有就是用乙酸乙酯提取的部位确定是你要的成分吗?如果含的杂质过多,也会导致点样处展不动的情况,是否可以尝试用不同溶剂分部位提取,再点样看呢,最后,展开前展开缸要先用展开剂饱和20分钟,展开过程中板子不能没入展开剂,这些问题也要注意到,个人意见,希望有所帮助。
另:建议楼主进一步了解该物质的化学性质,从性质上入手再看TLC的结果。
真实坦然
4楼2008-03-15 12:45:18
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)


liudaochuang(金币+1,VIP+0):是发酵液酸性条件下的萃取物,成分比较复杂。谢谢!
微生物发酵液跑薄层板出这样的结果很正常。
因为发酵液里面估计不止是单一的化合物,和纯净物跑薄层板不一样。
假如你知道你的发酵液是单一的物质,那你的展开剂组成比例还需要优化。
拔毛的凤凰真的不如个鸡吧?
5楼2008-03-15 12:50:16
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tdfeng871

铁杆木虫 (正式写手)

科研民工

有些物质在硅胶上分离有限,建议换板子,如聚酰胺或纤维素板,该放就放吧。
迷失的自我
6楼2008-03-15 13:12:22
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

感谢大家的帮助

感谢大家的帮助,改了条件,现在好多了,TLC条件是氯仿:甲醇:甲酸=100:20:1 ,应该还有改进的余地,请大家不吝赐教啊!!
7楼2008-03-21 21:10:58
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abcme910

至尊木虫 (知名作家)

天然苯乙醇

建议改为石油迷:异丙醇系统,或者加几滴醋酸
8楼2008-03-21 23:39:47
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yaowushi

木虫 (正式写手)

HPLC 分析一下吧
9楼2008-03-22 11:45:49
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familyhealthy

新虫 (初入文坛)

在Ph3的情况下用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯也会有部分水解,产生乙酸,使样品极性变大。
10楼2008-03-22 22:05:25
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