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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 麻烦大家帮我分析一下TLC是怎么回事
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

[交流] 麻烦大家帮我分析一下TLC是怎么回事

微生物发酵液在pH3.0用乙酸乙酯萃取后上薄层，下面是我的TLC图，展开条件是石油醚：乙酸乙酯＝2：1，GF254板，荧光图上的黑色长带都是活性物质，为什么会爬的那么弥散，点样孔处有一批东西基本没有展开（可以排除过载），试了很多展开体系和条件都是这样（目标物质是未知物，只知道是芳香类），请问大家，这样的图是正常的吗？有哪类物质可能出现这样的TLC图？能够全面回答我的问题的赠送3-5个金币。

[ Last edited by liudaochuang on 2008-3-15 at 10:04 ]
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1楼 2008-03-15 09:12:20
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红橙子

银虫 (正式写手)
★
liudaochuang(金币+1,VIP+0):可以试试，谢谢！
有些脱尾，你试过其他展开体系吗？比如氯仿甲醇体系。我用石油醚乙酸乙酯如果托尾就会考虑氯仿甲醇体系，按照极性你可以试试氯仿比甲醇10：1，15：1，20：1。
还有点样的时候不要太浓了。
愚见
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2楼2008-03-15 10:39:40
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snower976

银虫 (初入文坛)
★
liudaochuang(金币+1,VIP+0):不是拖尾，右边是点样处，是根本就没有分离度，试了很多条件都这样
是不是展开剂的极性太小了，试试配大一点
带有酸性物质也会拖尾，用K2CO3或饱和食盐水洗一下试试
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3楼2008-03-15 10:53:46
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jingjingkitten

铜虫 (小有名气)
★ ★
liudaochuang(金币+2,VIP+0):已经可以排除过载，所要分离的是未知物，只知道是酚酸类的物质，还是很感谢你！
调整下展开剂的比例，把乙酸乙酯的比例调高点尝试下呢？另外，我还是怀疑是否是过载，上样量尽量不要多于10uL,还有就是用乙酸乙酯提取的部位确定是你要的成分吗？如果含的杂质过多，也会导致点样处展不动的情况，是否可以尝试用不同溶剂分部位提取，再点样看呢，最后，展开前展开缸要先用展开剂饱和20分钟，展开过程中板子不能没入展开剂，这些问题也要注意到，个人意见，希望有所帮助。
另：建议楼主进一步了解该物质的化学性质，从性质上入手再看TLC的结果。
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真实坦然
4楼2008-03-15 12:45:18
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)
★
liudaochuang(金币+1,VIP+0):是发酵液酸性条件下的萃取物，成分比较复杂。谢谢！
微生物发酵液跑薄层板出这样的结果很正常。
因为发酵液里面估计不止是单一的化合物，和纯净物跑薄层板不一样。
假如你知道你的发酵液是单一的物质，那你的展开剂组成比例还需要优化。
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拔毛的凤凰真的不如个鸡吧？
5楼2008-03-15 12:50:16
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tdfeng871

铁杆木虫 (正式写手)

科研民工
有些物质在硅胶上分离有限，建议换板子，如聚酰胺或纤维素板，该放就放吧。
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迷失的自我
6楼2008-03-15 13:12:22
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

感谢大家的帮助

感谢大家的帮助，改了条件，现在好多了，TLC条件是氯仿：甲醇：甲酸＝100：20：1 ，应该还有改进的余地，请大家不吝赐教啊！！
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7楼2008-03-21 21:10:58
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abcme910

至尊木虫 (知名作家)

天然苯乙醇
建议改为石油迷:异丙醇系统,或者加几滴醋酸
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8楼2008-03-21 23:39:47
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yaowushi

木虫 (正式写手)
HPLC 分析一下吧
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9楼2008-03-22 11:45:49
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familyhealthy

新虫 (初入文坛)
在Ph3的情况下用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯也会有部分水解，产生乙酸，使样品极性变大。
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10楼2008-03-22 22:05:25
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