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viviwei503

木虫 (小有名气)

[交流] 求助!蛋白质溶液的配置!

我在实验中,一般用pH 7.4 的PBS配置蛋白溶液,但蛋白经常团聚
请问,我应该用什么缓冲溶液或者试剂才能使蛋白的分散性比较好,并且能够尽可能放久点。
万分感谢了!
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zhang8211jie

铜虫 (小有名气)


viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
你好,你用PH7.4PBS做稀释液配制1mg/ml的BSA(牛血清白蛋白)液,再用该液配制你的蛋白溶液。
2楼2008-03-15 13:32:59
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
换用别的缓冲液如tris,或者改变一下ph??
3楼2008-03-15 16:31:32
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viviwei503

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhang8211jie at 2008-3-15 13:32:
你好,你用PH7.4PBS做稀释液配制1mg/ml的BSA(牛血清白蛋白)液,再用该液配制你的蛋白溶液。

谢谢,但是我就是在配置BSA溶液啊。。
另外我在文献上,看到有人用二甲基亚砜来溶解蛋白,配成蛋白的储备液。
请问这个有机溶剂对蛋白活性等性质有没有什么影响的?
4楼2008-03-15 18:59:38
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viviwei503

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by puma2003 at 2008-3-15 16:31:
换用别的缓冲液如tris,或者改变一下ph??

谢谢!如果用缓冲液tri的话,应该配置什么浓度和酸度比较适合?用hepes缓冲液可以嘛?
5楼2008-03-15 19:02:28
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by viviwei503 at 2008-3-15 19:02:



    谢谢!如果用缓冲液tri的话,应该配置什么浓度和酸度比较适合?用hepes缓冲液可以嘛?

配备BSA不用缓冲液吧?水不就行了?你浓度过大??
6楼2008-03-16 13:49:43
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viviwei503

木虫 (小有名气)

我配置的是10mg/ml,不算浓度很大吧


我是想让我配置的蛋白溶液分散性比较好,不容易团聚,而不是只是蛋白溶液。。。
你们平时怎么使蛋白溶液分散性比较好不容易团聚啊。
7楼2008-03-16 15:33:34
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mark32280667806


viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
先用DNAMEN 或者GENTOOL预测一下,你目标蛋白的PI,然后在选择缓冲液,尽量避免缓冲液的PH值在,蛋白质的PI附近。完毕!!!
8楼2008-03-17 14:44:22
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soniabee

铜虫 (初入文坛)

我平时配的10mg/ml的BSA的母液,用水或者碳酸氢铵配的,溶的非常彻底,没有团聚呀
9楼2008-03-17 23:05:22
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viviwei503

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by soniabee at 2008-3-17 23:05:
我平时配的10mg/ml的BSA的母液,用水或者碳酸氢铵配的,溶的非常彻底,没有团聚呀

问题是用碳酸氢铵那会不会使得蛋白变性啊?
那你的溶液可以放置多久。
我所说的不团聚,不是肉眼看到的,而是要在nm显微镜下观察都是单个的蛋白
10楼2008-03-18 08:29:13
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