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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助！蛋白质溶液的配置！
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viviwei503

木虫 (小有名气)

[交流] 求助！蛋白质溶液的配置！

我在实验中，一般用pH 7.4 的PBS配置蛋白溶液，但蛋白经常团聚。
请问，我应该用什么缓冲溶液或者试剂才能使蛋白的分散性比较好，并且能够尽可能放久点。
万分感谢了！
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1楼 2008-03-15 08:55:28
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zhang8211jie

铜虫 (小有名气)
★
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
你好，你用PH7.4PBS做稀释液配制1mg/ml的BSA（牛血清白蛋白）液，再用该液配制你的蛋白溶液。
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2楼2008-03-15 13:32:59
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
换用别的缓冲液如tris，或者改变一下ph？？
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3楼2008-03-15 16:31:32
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viviwei503

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhang8211jie at 2008-3-15 13:32:
你好，你用PH7.4PBS做稀释液配制1mg/ml的BSA（牛血清白蛋白）液，再用该液配制你的蛋白溶液。

谢谢，但是我就是在配置BSA溶液啊。。
另外我在文献上，看到有人用二甲基亚砜来溶解蛋白，配成蛋白的储备液。
请问这个有机溶剂对蛋白活性等性质有没有什么影响的？
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4楼2008-03-15 18:59:38
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viviwei503

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by puma2003 at 2008-3-15 16:31:
换用别的缓冲液如tris，或者改变一下ph？？

谢谢！如果用缓冲液tri的话，应该配置什么浓度和酸度比较适合？用hepes缓冲液可以嘛？
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5楼2008-03-15 19:02:28
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by viviwei503 at 2008-3-15 19:02:



    谢谢！如果用缓冲液tri的话，应该配置什么浓度和酸度比较适合？用hepes缓冲液可以嘛？

配备BSA不用缓冲液吧？水不就行了？你浓度过大？？
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6楼2008-03-16 13:49:43
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viviwei503

木虫 (小有名气)
我配置的是10mg/ml，不算浓度很大吧


我是想让我配置的蛋白溶液分散性比较好，不容易团聚，而不是只是蛋白溶液。。。
你们平时怎么使蛋白溶液分散性比较好不容易团聚啊。
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7楼2008-03-16 15:33:34
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mark32280667806

★
viviwei503(金币+1,VIP+0):谢谢
先用DNAMEN 或者GENTOOL预测一下，你目标蛋白的PI，然后在选择缓冲液，尽量避免缓冲液的PH值在，蛋白质的PI附近。完毕！！！
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8楼2008-03-17 14:44:22
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soniabee

铜虫 (初入文坛)
我平时配的10mg/ml的BSA的母液，用水或者碳酸氢铵配的，溶的非常彻底，没有团聚呀
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9楼2008-03-17 23:05:22
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viviwei503

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by soniabee at 2008-3-17 23:05:
我平时配的10mg/ml的BSA的母液，用水或者碳酸氢铵配的，溶的非常彻底，没有团聚呀

问题是用碳酸氢铵那会不会使得蛋白变性啊？
那你的溶液可以放置多久。
我所说的不团聚，不是肉眼看到的，而是要在nm显微镜下观察都是单个的蛋白
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10楼2008-03-18 08:29:13
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