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[交流]
求助RT-HPCL分离多肽
如电泳图片所示,目的蛋白分子量大约25KD
与目的蛋白条带有一个特别接近的条带,请问应该需用什么条件才可可以把两个几乎叠加的蛋白条带分开
我以前用以下条件,但效果不理想
(Waters μBondapak C18(5μm,250mm×4.6mm i.d.)分析柱;进样量为20μL;流速1.0mL/min;检测波长230nm;检测温度为室温;流动相A为含有0.1%三氟乙酸(TFA)的水溶液,流动相B为含有0.1%三氟乙酸(TFA)的乙腈溶液,采用线性梯度洗脱:流动相B的体积分数在30分钟内由5%线性升至50%。)

http://http://img.dxy.cn/upload/2008/03/14/34260751.jpg][img] |
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