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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助RT-HPCL分离多肽
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hanjiantaohjt

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助RT-HPCL分离多肽

如电泳图片所示，目的蛋白分子量大约25KD

与目的蛋白条带有一个特别接近的条带，请问应该需用什么条件才可可以把两个几乎叠加的蛋白条带分开

我以前用以下条件，但效果不理想

（Waters μBondapak C18(5μm,250mm×4.6mm i.d.)分析柱；进样量为20μL；流速1.0mL/min；检测波长230nm；检测温度为室温；流动相A为含有0.1%三氟乙酸（TFA）的水溶液，流动相B为含有0.1%三氟乙酸（TFA）的乙腈溶液，采用线性梯度洗脱：流动相B的体积分数在30分钟内由5%线性升至50%。）


http://http://img.dxy.cn/upload/2008/03/14/34260751.jpg][img]
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1楼 2008-03-14 20:01:38
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goodmood

银虫 (小有名气)
蛋白的疏水性一般比较强，一般不用c18反向柱纯化吧
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2楼2008-03-24 19:54:22
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calpain

金虫 (小有名气)
分子量大的可以用C4反相柱纯化
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3楼2008-07-13 19:19:06
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