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liudaochuang

金虫 (小有名气)

[交流] 麻烦大家帮我分析一下是怎么回事啊

微生物发酵液在pH3.0用乙酸乙酯萃取后上薄层,下面是我的TLC图,展开条件是石油醚:乙酸乙酯=2:1,GF254板,荧光图上的黑色长带都是活性物质,为什么会爬的那么弥散,点样孔处有一批东西基本没有展开(可以排除过载),试了很多展开体系和条件都是这样(目标物质是未知物,只知道是芳香类),请问大家,这样的图是正常的吗?有哪类物质可能出现这样的TLC图?能够全面回答我的问题的赠送3-5个金币。

[ Last edited by liudaochuang on 2008-3-15 at 10:05 ]
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flybird12345

银虫 (初入文坛)


liudaochuang(金币+1,VIP+0):谢谢
我没做过微生物发酵液,也不知道它的成分如何.但从图形上看,觉得可以从下面几方面考虑改善:
1.可能是展开液对样品的溶解度不够好,所以原点处还有这么多样品.
2.样品具有一定极性,被板子吸附严重,尝试一下降低活性板子.
3. 调pH值
2楼2008-03-18 16:03:35
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883475

银虫 (小有名气)


首先就是样品太浓了
3楼2008-03-18 19:28:09
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bjzhuxiaobo

金虫 (正式写手)

拖尾原因及其对策

★ ★ ★
liudaochuang(金币+3,VIP+0):分析得很全面 谢谢
根据我的实验经验,薄层色谱出现拖尾的原因及其解决办法:
拖尾原因:
1.样品较浓
2样品未溶解完全,点在班上的样品有未溶固体样品
3.板未干,含水,或者放入展开剂前未充分吹干,
4.样品为强极性物质,含有氨基或者羧基等极性官能团;
相应解决办法:
1、可以少取一点,或稀释样品后再点;
2、要保证点在薄层板上的样品一定要是溶液形式;
3、若是自制板,虽然经过一夜水分会挥发干,保险起见还是放置久一些或烘干活化一下,尤其是气候特别潮湿的地方
4、对碱性和酸性样品应分别在展开剂中加入少量碱性或酸性溶剂形成竞争吸附避免拖尾,或者制成碱性板(用一定浓度氢氧化钠制板)或酸性板
4楼2008-03-18 20:34:06
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yangyuheng

金虫 (小有名气)

拖尾可能是样品太浓,板活化的时间不够或者点样的环境湿度太大
个人建议在展开岗放一小杯浓硫酸~~~~
有石油醚的最好在低温下展开!!
5楼2008-03-18 20:41:00
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lybio

金虫 (正式写手)

基本没跑起来
用氯仿:甲醇:水来试试
6楼2008-03-19 19:04:58
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

感谢大家的帮助,改了条件,现在好多了

感谢大家的帮助,改了条件,现在好多了,TLC条件是氯仿:甲醇:甲酸=100:20:1 ,应该还有改进的余地,请大家不吝赐教啊!!
7楼2008-03-21 21:11:22
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bruceluobo

银虫 (小有名气)

还是没跑起来,再增大机性,根据物质的酸减性可以相应的加盐酸或氨水
有事没事投一锅,锅锅有惊喜
8楼2008-03-22 09:54:43
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cx83214

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
liudaochuang(金币+3,VIP+0): 鼓励新虫!谢谢应助!
改进了后,效果的确好很多了。
如你是用的自制薄层板,建议选用高效波层板再试试。拖尾可能还有一个原因:
展开剂的选择性不好,可继续考察与你展开效果较好的展开剂极性相当的展开剂。
适当的降低点样量吧。
9楼2008-03-22 10:45:41
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