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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] [color=Blue][b]大肠杆菌感受态转化过程为什么出现了白色沉淀[/b][/color]

大肠杆菌感受态转化过程为什么出现了白色沉淀?沉淀是什么呢?转化试验使用的感受态细胞是通过试剂盒制备的。转化涂板到现在已经24h,没有转化子,是不是与沉淀有关?请各位虫友帮忙分析一下原因,谢谢!
[search]感受态 沉淀 转化[/search]
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

请大家多多帮助,急急急!!
2楼2008-03-14 16:53:25
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

说明白点,在哪一步出现的沉淀呀?才好帮你分析
3楼2008-03-14 18:06:46
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 关注,.
呵呵,白色沉淀如果不是污染的化是不是菌太多了,感觉不会影响,如果没有转化子的化也说不清楚,最好你找一个一定可以转出来的感受态做个control确定你其它的工作没有任何问题.(比如说抗生素是不是用错了,热击是不是忘记了,活化时是不是也加了抗生素之类的,呵呵,不知道讲的对不对
4楼2008-03-14 19:21:23
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 关注,.
主要是你摇菌时候出的问题吧,180转摇菌后,你是不是用离心机离心了。如果离心了的话你可以把那些都涂上。没有长菌,那原因就多了,第一,感受态是不是有问题。第二,转化过程是不是有问题,42°热击是不是动了试管。第三,平板是不是新鲜配置。第四,抗生素是不是没有用对。第五,连接是不是很好。
5楼2008-03-14 21:55:39
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

是在摇菌复苏的过程中出现的白色沉淀,5楼的虫友好像遇到过这样的问题,不知道这个沉淀是什么?难道是菌浓太大了?
6楼2008-03-15 09:44:24
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 关注,.
复苏过过程要摇吗?
我从来不摇的,只是在37度静置1小时以上,基本上每次都会有白色沉淀,那就是菌体,转进的没转进的都有

注意涂平板的时候一定要把菌体吸完,转进的最爱沉在管子下边
7楼2008-03-15 19:45:04
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

谢谢ganchao1776虫友的宝贵经验!
8楼2008-03-16 15:09:24
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