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大家帮忙计算下这对引物的最优退火温度吧，5个金币咯
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直接告诉我设置PCR程序时需要设置的温度即可，P出来了就把金币都给你啦！ Ps: 5‘- ATACC ATG GTA AGT AAA GGA TTT AGT ACC C-3′, Pa: 5 ‘-ATAGGATCCTATTACTCAGCTCCAATTGT-3′ 我不太会计算，有谁能帮忙算下，多谢！ |
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4. 优化退火温度 ：退火温度的优化首先要采用几种方法中的一种来计算引物－模板对的Tm值，其中最简单的方法是Tm＝4（G+C）+2（A+T），一个单一碱基的错配大约降低Tm值5℃。也可以采用更加复杂的公式，但实践中由于Tm值受缓冲液中各个成分甚至引物和模板浓度的不同影响，所以任何计算的Tm值都应该看作是大致值。进行退火温度的摸索时有一定间隔（2～5℃），从高到低直到低于Tm值5℃的一系列反应可以大致估计出给定条件下的最佳退火温度。 http://www.genecool.com/bbs/view ... amp;page=1#pid31270 |
2楼2008-03-14 11:11:00
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