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sofu

金虫 (正式写手)

[交流] 关于DNA Blunting Kit

关于DNA Blunting Kit
在Takara目录里看到了有个Kit是DNA Blunting Kit。我有点不懂,请各位指教。
它的功能是补齐5‘突出末端和切齐5’凹陷末端。

请问什么情况会出现5’凹陷末端?这样切齐有什么实验上的应用呢?

我知道PCR可能会出现5‘突出末端,但是PCR会不会出现5’凹陷末端?

因为我做的定点突变实验要先用高保真酶将质粒整体PCR成线性DNA,然后在环化。环化前是否要blunting?(试剂盒上要做,我认为没有必要),请各位指教。
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"An expert is a man who has made all the mistakes which can be made, in a very narrow field." -- Niels Henrik David Bohr
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

限制性内切酶酶切时会出现5‘突出末端或者5’凹陷末端,看用的是什么酶。切齐的目的是防止重新连接。你的实验应该不要做。
2楼2008-03-14 09:52:56
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