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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 智商捉急，求大神指点有关过柱分离的问题
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dadeniang

金虫 (初入文坛)

general

[求助] 智商捉急，求大神指点有关过柱分离的问题 已有4人参与

研一，刚进实验室条件简陋。老师让做银杏黄酮的提取。带着本科生做毕设。分离过柱对我来说是个完全陌生的东西啊,无奈定做了个柱子还没送到。但是对未做过的东西完全茫然不知所措。
目前主要做了的是1   用乙醇回流提取然后石油醚萃取除杂浓缩得到了粗制品。
                            2   下一步做分离老师只给提供了层析用硅胶。
我的问题是。       1  单纯用硅胶柱能够分离出黄酮否？
                            2 用硅胶过柱该用什么做溶剂上柱子？然后用什么做洗脱溶剂啊？大概比例是多少？
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不来小木虫不知道天高地厚
1楼 2014-05-12 17:12:23
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燕儿南飞~

新虫 (小有名气)
我最近也在准备硅胶柱呐！
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海纳百川
2楼2014-05-20 11:31:59
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燕儿南飞~

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-20 12:49:25
1  单纯用硅胶柱能够分离出黄酮否
2 用硅胶过柱该用什么做溶剂上柱子？然后用什么做洗脱溶剂啊？大概比例是多少？


1 反复柱层析应该能达到纯化目的的吧！
2 要看你样品的溶解度哦！一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后
的溶剂（所以你要先把你的样品跑TLC看一下哦，要使所需点在Rf值在0.2-0.3左右的比
较好）。极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极
性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统等等，具体情况具体分析。

PS：我也是新手，相互学习哦！
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海纳百川
3楼2014-05-20 11:35:39
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紫衣轻骑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以分开的，多用不同体系的洗脱剂反复上硅胶柱子。

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-05-20 15:42:39
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燕儿南飞~

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 燕儿南飞~ at 2014-05-20 11:35:39
1  单纯用硅胶柱能够分离出黄酮否
2 用硅胶过柱该用什么做溶剂上柱子？然后用什么做洗脱溶剂啊？大概比例是多少？


1 反复柱层析应该能达到纯化目的的吧！
2 要看你样品的溶解度哦！一般淋洗剂是采用TLC分析得 ...

写错了，好像是Rf在0.2~0.6之间比较好。
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海纳百川
5楼2014-05-22 18:13:52
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aying092

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2014-05-22 21:08:50
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zfcody

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1  单纯用硅胶柱能够分离出黄酮否？
2 用硅胶过柱该用什么做溶剂上柱子？然后用什么做洗脱溶剂啊？大概比例是多少？

1.多次硅胶柱能分离到纯物质。我们以前实验室开始时条件很简陋，只有硅胶柱，分离到了很多化合物（不过都是已知化合物）。
2.先确定洗脱剂。就是用洗脱剂上柱。比例应该先在TLC上摸索好。RF0.3最好。黄酮极性不算小的，试试石油醚丙酮吧，乙酸乙酯丙酮，极性更大的话，二氯甲烷甲醇。
我们曾经分离过黄酮类物质，可以先过一遍大孔树脂柱，用不同浓度的乙醇洗，能富集到黄酮。
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7楼2014-05-27 10:33:43
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