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我听五月天木虫 (正式写手)
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[求助]
ELISA测细胞摄取率，看明白想不明白！！！
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收集细胞铺种于96孔板，铺种密度1万个／孔，继续培养一天，加药，次序为：5孔加入PBS(pH=7．4)为阴性对照， 5孔加入抗HIF-1 a单克隆抗体作为阳性对照，剩余孔分为两组：一组每孔加3uL 抗HIF-1a- PTX Pluronic P123免疫胶束(anti-HIF-1a-NMs-PTX)，一组每孔加3 uLPTX Pluronic P123胶束(NMs-PTX)，每孔补足样液至200uL，置培养箱中继 续培养1h，每孔以PBS洗涤3次，每孔加HRP标记羊抗小鼠IgG二抗(H+L) (1：4000稀释)细胞培养箱中孵育，PBS洗涤3次，加定量TMB显色剂显色10min 2 mol／L硫酸终止显色，以酶标仪于450nm处检测所有样孔的吸光度，按以下公式计算摄取 二抗肯定是结合HIF-1 a单克隆抗体才对啊，然后NMs-PTX是怎么确定摄取率的？没接HIF-1 a单克隆抗体的胶束进入了细胞也不能结合二抗啊？ |
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