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[交流]
WB过程中marker越跑越淡最后消失
最近一直在做WB,用的是8%的胶和康为世纪高分子量蓝色预染marker(CW2013)上样量10ul,在浓缩胶和分离胶刚开始的时候都能看到marker的条带,颜色,带型也是一样的,可是跑到后来上面的蓝色条带消失了,蓝色全部集中在最后的一条带上,颜色很重。其他泳道的蛋白则没有有任何的情况,曝光出来的图片也是很好的,条带压的很细,很漂亮,只有marker出现这种情况,最开始是怀疑marker出现质量问题以及marker处理的问题,单独跑了一块8%胶发现没有任何降解的情况,考马斯亮蓝染色 ![\"WB过程中marker越跑越淡最后消失\"]()
现在怀疑是上样过程出现问题,因为上样的时候有相间隔的泳道loading buffer 5x (DTT)因为上样的原因会有飘进marker的情况?会不会是其中的DTT或其他成分将偶联的染色剂分开了,造成了这样的情况? |
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