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yzhqs

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 少量的蛋白溶液如何脱盐?

请教各位虫子,我提取了一些蛋白,这些蛋白得来不易,可是量很少。而且后面还要做吸附和洗脱然后电泳。因为洗脱时要用到醋酸钠和氯化钠,盐会影响电泳的吧,请教各位,怎么样对少量的蛋白进行脱盐呢?万分感谢啊!
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mapleleaf7410

木虫 (正式写手)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
利用适当截留分子量的透析袋
2楼2008-03-12 21:21:12
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yzhqs

至尊木虫 (著名写手)

用透析袋的话,会不会损失很大啊?我一共才300ul
3楼2008-03-12 21:47:20
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yzhqs

至尊木虫 (著名写手)

请问,如果有醋酸钠和氯化钠的话,至少要用多大截流范围的透析袋,能保证除掉这些盐呢?我的蛋白溶液挺复杂,无法准确估计分子量。所以希望用小点截流范围的透析袋,但是要小到什么程度呢?多谢了!
4楼2008-03-13 10:38:01
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

★
asr(金币+1,VIP+0):谢谢,但提供的连接没有显示的内容。请查看一下。:P
我用过millipore公司的超滤管,具体型号看你的蛋白质大小了,比较适合小量样品,回收效率较好,就是价格较贵
http://www.millipore.com/catalog ... lications=taxonomy:^73RQ2G/73RQ3B/73SW24/73U8EJ&taxonomyBoostId=73SW24
5楼2008-03-13 11:50:32
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

★ ★
asr(金币+2,VIP+0):谢谢,辛苦了.:P
en,不知道为什么我贴的网页打不开,简单说一下步骤,去millipore中国网页,点击产品,在生命科学类下面选择过滤&样品制备,再选择离心超滤管,会出来很多产品,具体哪个合适楼主用就要你自己看看说明了
6楼2008-03-13 12:37:35
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yzhqs

至尊木虫 (著名写手)

到millipore看过了,很有帮助,这个离心超滤管对蛋白样品既能浓缩也能脱盐。对我的实验很有帮助。totoro一家亲真是个热心人,已经帮我解决了很多问题,十分感谢totoro一家亲!
能否请斑竹帮忙转移10个金币给totoro一家亲?
7楼2008-03-13 14:59:13
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zhjcao

木虫 (小有名气)

如果作电泳的话,你对结果要求不是非常高的话可以不脱盐,我用70%和20%硫酸氨沉淀蛋白,直接电泳,效果见附图!左为75%;右为25%
8楼2008-03-13 15:13:36
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zhang8211jie

铜虫 (小有名气)

使用透析袋,一般蛋白分子量都在数KDa或更大。透析袋有很多规格的,你自己看看,选择合适的不会丢失蛋白的。我用透析袋透析,透过110ul的。你的蛋白不少了。
9楼2008-03-15 15:15:05
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