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yating3788

金虫 (小有名气)

[求助] 糖蛋白 PAS染色紧急求助!!!希望高手大神帮我看看问题出在哪里??

糖蛋白的SDS-PAGE,PAS 染色过程如下:
跑胶结束后,10%TCA固定30min,
蒸馏水冲洗5遍,
1%高碘酸水溶液染色1h,
蒸馏水充分冲洗,并置于蒸馏水中浸泡1h,
schiff试剂染色1h,
1%亚硫酸氢钠脱色。
其中schiff试剂配制:1.5g碱性品红溶于沸水中,冷却至室温加入25ml 2MHCL,加入3.75g 偏重亚硫酸钠,定容至500ml。室温避光放置24h,加入1.25g活性炭脱色,待溶液变为无色,过滤至棕色试剂瓶4℃保存。

这样的染色过程下来,我的胶根本不显色,我试过染色一整夜,也没什么变化。但是考马斯染色很成功,胶跑的没问题,样品中是肯定有糖是确定的!
我可能是哪个地方忽略了,希望高手大神能帮我看看?
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yating3788

金虫 (小有名气)

请有经验的前辈们帮帮忙
2楼2014-05-09 09:19:40
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yating3788

金虫 (小有名气)

请前辈们帮忙!
3楼2014-05-09 19:51:41
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yating3788

金虫 (小有名气)

求助求助
4楼2014-05-26 15:45:13
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ruo-ruchu

新虫 (初入文坛)

请问前辈PAS这个染色你做出来了吗?对于这个染色我也遇到和你相同的问题
5楼2015-07-17 14:51:48
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惜娜柏祺

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ruo-ruchu at 2015-07-17 14:51:48
请问前辈PAS这个染色你做出来了吗?对于这个染色我也遇到和你相同的问题

请问前辈PAS这个染色你做出来了吗?对于这个染色我也遇到和你相同的问题
6楼2022-06-13 09:47:49
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