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yating3788金虫 (小有名气)
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[求助]
糖蛋白 PAS染色紧急求助!!!希望高手大神帮我看看问题出在哪里??
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糖蛋白的SDS-PAGE,PAS 染色过程如下: 跑胶结束后,10%TCA固定30min, 蒸馏水冲洗5遍, 1%高碘酸水溶液染色1h, 蒸馏水充分冲洗,并置于蒸馏水中浸泡1h, schiff试剂染色1h, 1%亚硫酸氢钠脱色。 其中schiff试剂配制:1.5g碱性品红溶于沸水中,冷却至室温加入25ml 2MHCL,加入3.75g 偏重亚硫酸钠,定容至500ml。室温避光放置24h,加入1.25g活性炭脱色,待溶液变为无色,过滤至棕色试剂瓶4℃保存。 这样的染色过程下来,我的胶根本不显色,我试过染色一整夜,也没什么变化。但是考马斯染色很成功,胶跑的没问题,样品中是肯定有糖是确定的! 我可能是哪个地方忽略了,希望高手大神能帮我看看? |
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