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yating3788金虫 (小有名气)
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[求助]
糖蛋白 PAS染色紧急求助！！！希望高手大神帮我看看问题出在哪里？？
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糖蛋白的SDS-PAGE，PAS 染色过程如下： 跑胶结束后，10%TCA固定30min， 蒸馏水冲洗5遍， 1%高碘酸水溶液染色1h， 蒸馏水充分冲洗，并置于蒸馏水中浸泡1h， schiff试剂染色1h， 1%亚硫酸氢钠脱色。 其中schiff试剂配制：1.5g碱性品红溶于沸水中，冷却至室温加入25ml 2MHCL，加入3.75g 偏重亚硫酸钠，定容至500ml。室温避光放置24h，加入1.25g活性炭脱色，待溶液变为无色，过滤至棕色试剂瓶4℃保存。 这样的染色过程下来，我的胶根本不显色，我试过染色一整夜，也没什么变化。但是考马斯染色很成功，胶跑的没问题，样品中是肯定有糖是确定的！ 我可能是哪个地方忽略了，希望高手大神能帮我看看？ |
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