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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » ERIC-PCR
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扣扣最牛

银虫 (正式写手)

[交流] ERIC-PCR 已有3人参与

有没有做ERIC-PCR,关于菌群多样性分析的，反应条件是：95℃ 7min 95℃ 30s  52℃ 1min 65℃ 8min 65℃ 16min
25微升体系：
模板3微升
引物各0.5微升
Mix  12微升
双蒸水9 微升
试了好几次  P出来只有一条带  大概在750bp处有一条亮带
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梅花香自苦寒来
1楼 2014-05-06 10:26:17
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
★
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95℃预变性7 min，然后进行30次循环（94℃，1 min
52℃，1 min
65℃，8 min），最后65℃延伸15 min



表示有多条带
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做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-05-06 21:49:41
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
★
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不太懂~为什么只有一条带~
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3楼2014-05-06 21:54:12
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扣扣最牛

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-05-06 21:49:41
95℃预变性7 min，然后进行30次循环（94℃，1 min
52℃，1 min
65℃，8 min），最后65℃延伸15 min



表示有多条带

我用的是MIX   是不是镁离子含量的问题啊  在750bp处有一条很亮的带
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梅花香自苦寒来
4楼2014-05-07 11:05:12
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
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做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2014-05-07 18:23:49
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扣扣最牛

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-05-07 18:23:49
体系可能会有影响，可以试下...

恩  老师也这么说  决定不用MIX   明天重P下
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梅花香自苦寒来
6楼2014-05-07 19:06:40
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shimen

新虫 (正式写手)
★
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7楼2014-08-21 11:35:37
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扣扣最牛

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shimen at 2014-08-21 11:35:37
请问楼主后面的实验怎么样了啊，我也做这个实验，Mg离子浓度要提高点，我的能扩出很多条带，但是不稳定，同样的方法处理的模版有的有产物，有的没产物，或只有1条带，还没弄懂原因。如果你做出来了，麻烦分享下你的 ...

我的没做出来     暂时没有做了

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梅花香自苦寒来
8楼2014-08-21 14:10:42
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