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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PAGE胶染色的一个问题
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gmdp

金虫 (小有名气)

[交流] PAGE胶染色的一个问题

我的PAGE银染程序是这样的
1，硝酸银 10min
2，清水漂洗30s
3，显色（300ml水，3.3ml甲醛，4.5gNaOH）
我想问一下甲醛和NaOH的作用是什么哦？
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1楼 2008-03-11 12:21:45
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tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)
银离子与DNA结合后与NaOH反应显色
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wherethereisawill,thereisaway!
2楼2008-03-11 13:12:20
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tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢,但甲醛的作用不止这个哦.
甲醛可以提高染色灵敏度
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wherethereisawill,thereisaway!
3楼2008-03-11 13:20:54
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
★ ★
gmdp(金币+1,VIP+0):谢谢
reasonspare(金币+0,VIP+0):这个解释还算可以. 但是一定要使用弱碱,诸如冰冷的碳酸钠. 否则银镜反应不会发生.
reasonspare(金币+1,VIP+0):忘了加分
银染色液中的银离子(Ag+ ）可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂甲醛使Ag+还原成银颗粒，可把核酸电泳带染色黑褐色。碱性条件有利于沉降。
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细推物理须行乐。
4楼2008-03-11 13:20:59
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gmdp

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tigerzh at 2008-3-11 13:12:
银离子与DNA结合后与NaOH反应显色

也就是不加甲醛也能显出来？是吧？
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5楼2008-03-11 16:47:54
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gmdp

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tigerzh at 2008-3-11 13:20:
甲醛可以提高染色灵敏度

怎么说必须加甲醛，才能反应是吧？
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6楼2008-03-11 16:48:43
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
gmdp(金币+1,VIP+0):谢谢
reasonspare(金币+0,VIP+0):z这就是所谓的银镜反应.
reasonspare(金币+1,VIP+0):忘了加分
引用回帖:
Originally posted by lauren180 at 2008-3-11 13:20:
银染色液中的银离子(Ag+ ）可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂甲醛使Ag+还原成银颗粒，可把核酸电泳带染色黑褐色。碱性条件有利于沉降。

碱性条件下，甲醛可与Ag+发生还原反应，产物是甲酸和Ag,显黑色，甲酸被NaOH吸收，有利于反应继续进行
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7楼2008-03-11 22:23:18
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tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)
reasonspare(金币+0,VIP+0):第一次听说,请虫友有机会,介绍一下,
Quote:
Originally posted by tigerzh at 2008-3-11 13:20:
甲醛可以提高染色灵敏度  



怎么说必须加甲醛，才能反应是吧？
不用甲醛也可以！
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wherethereisawill,thereisaway!
8楼2008-03-13 23:25:43
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reasonspare

木虫 (著名写手)
PAGE胶染色的一个问题

我的PAGE银染程序是这样的
1，硝酸银 10min
2，清水漂洗30s
3，显色（300ml水，3.3ml甲醛，4.5gNaOH）
我想问一下甲醛和NaOH的作用是什么哦？

你这样做未必错,但是肯定不好.

第一背景太深,
第二条带太虚.
第三使用NaOH 反应过于激烈,效果不会很好,
第四,一定使用甲醛,
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
9楼2008-03-14 04:09:43
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amanda006006

我们实验室用的染色方法

我们实验室用的染色方法是：
1、硝酸银1g/1LH2O  10min
2，清水漂洗30s
3，显色（1000ml水，13ml甲醛，20gNaOH）
4、清水
5、碳酸钠（7.5g，1000ml水）
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10楼2008-03-14 11:28:02
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