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xiao希

铁虫 (初入文坛)

[求助] 目的蛋白有一条带缺失内参均一 已有1人参与

问题出现两次了,这一次重新跑了遍内参,发现泳道缺失的其实蛋白是转上了的,百思不得其解。
回想跑胶时貌似第一泳道有点飘,但跑到底时又没问题,marker清晰。请指点,谢谢!~

补充:上面那个全的是actin,下面是我的目的蛋白,是有两条带,曝光如果拉到最大还是可以看到第二泳道是有点蛋白,就好像是降解完了似的。actin跑出来说明上样转膜这块应该没问题。之前细胞的处理,这6个样品是一批过的,为啥总是第二道缺失,头大。。。。

目的蛋白有一条带缺失内参均一
CRT+Actin.jpg
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果同一个组里的其他样品没有问题那就可能是这个单个样品的问题。内参好不代表你的treatment对目的蛋白的影响就是OK的。
Permanent head Damage
2楼2014-05-03 12:51:55
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xiao希

铁虫 (初入文坛)

目前推断还是蛋白降解。各位有没有经历6孔板收细胞时即便是PBS洗过吸掉,但还是有一层水膜导致回收量比加的裂解液多呀?如何解决??
3楼2014-05-04 03:18:06
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