版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

2

lyta0

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1760.3
散金: 471
帖子: 260
在线: 96.9小时
虫号: 583300
注册: 2008-07-25
专业: 细胞信号转导

引用回帖:

10楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-05-02 01:33:45
这事不奇怪。经常出现。
两个方面分析我建议
首先。你若是挑的单克隆。换个单克隆试试。这极有可能是这个单克隆的特性。
然后。如果换了还不行。换个骨架试试。这很有可能是细胞毒性的问题。换一个对leak控制更严 ...

谢谢建议，你说的更严格的载体是什么？，还有表达系统？

11楼2014-05-02 01:49:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

寻尘

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 93.1
红花: 2
帖子: 86
在线: 30.4小时
虫号: 2596407
注册: 2013-08-14
性别: MM
专业: 基因表达调控与表观遗传学

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-05-03 10:45:19

刚巧最近也碰到这种情况，我觉得应该不是蛋白对菌有毒性，因为后来发现我做的基因在载体上连反了……所以蛋白应该没表达

12楼2014-05-02 23:27:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dingchaoyue

木虫 (著名写手)

应助: 32 (小学生)
金币: 783.2
散金: 112
红花: 5
帖子: 1484
在线: 269.5小时
虫号: 1918337
注册: 2012-07-31
性别: GG
专业: 植物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励交流！ 2014-05-03 10:45:48
lyta0: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-03 18:16:20

一、很有可能是噬菌体污染了。把你用的摇菌瓶等用醋酸消毒。
二、你操作过程污染了。
三、质粒重新转bl21活化，重新验证保菌再诱导。
d四、换超静工作台或者别的地方操作试试。
祝好运。

[ 发自小木虫客户端 ]

13楼2014-05-03 00:08:02

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zyf0227

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 55
帖子: 11
在线: 6.5小时
虫号: 1349385
注册: 2011-07-18
专业: 免疫学研究新技术与新方法

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-05-03 10:46:14

对菌液进行一下特性分析。

14楼2014-05-03 00:52:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dalincn

禁虫 (著名写手)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-05-03 10:46:32

本帖内容被屏蔽

15楼2014-05-03 09:00:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)

应助: 12 (小学生)
金币: 223.4
散金: 413
红花: 14
沙发: 1
帖子: 599
在线: 260.7小时
虫号: 3152575
注册: 2014-04-21
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-05-03 10:46:53

蛋白有细胞毒性，可以让它表达后排到细胞外去

[ 发自小木虫客户端 ]

16楼2014-05-03 09:18:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

weizhe34

至尊木虫 (职业作家)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 21984.2
散金: 22
红花: 2
帖子: 3849
在线: 921.6小时
虫号: 432244
注册: 2007-08-12
专业: 人类营养

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

rossata 为薄壁细菌需要注意前扩大时间与后诱导时间和培养条件

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

17楼2014-05-04 07:57:55

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yuhan131481

铁虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 416.7
散金: 30
红花: 2
帖子: 151
在线: 190.9小时
虫号: 1963226
注册: 2012-08-30
性别: GG
专业: 免疫学研究新技术与新方法

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

应该是所表达的蛋白具有细胞毒性吧搞得菌都挂掉了

18楼2014-05-04 15:59:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

181587941

金虫 (正式写手)

应助: 8 (幼儿园)
金币: 63.8
散金: 14
红花: 26
帖子: 549
在线: 114.8小时
虫号: 749231
注册: 2009-04-15
性别: GG
专业: 微生物学

【答案】应助回帖

不排除IPTG中带了噬菌体的可能。

19楼2014-11-19 09:39:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 lyta0 的主题更新

2