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zinc650

铜虫 (小有名气)

[求助] 新手求助做免疫荧光 如何选择N-Cadherin抗体 已有1人参与

先祝大家五一快乐哈!   

老板非让我一个学化学的做个免疫荧光。零基础请教关于抗体的事情。

我要做的是人肿瘤细胞的膜蛋白N-Cadherin抗体,希望染膜外部分,做激光共聚焦成像,那么我需要爬片嘛?可不可以直接用confocal皿?染膜外需要固定嘛?可不可以不固定直接做结合?

Santa这些抗体改选哪个?http://www.scbt.com/zh/table-n-cadherin.html

N-cadherin (L-13)和N-cadherin 抗体(N-19)选哪个?  

二抗怎么选啊? http://www.scbt.com/zh/research/ ... nd_normal_sera.html

可以选FCM下的传统二抗嘛?

该选什么动物的 anti-山羊的IgG-PE(因为想用PE染料)?
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

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感谢参与,应助指数 +1
固定是必要的,二抗能抗一抗就行,你要染几种蛋白呢?

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2楼2014-04-30 19:15:34
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zinc650

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
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2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-04-30 19:15:34
固定是必要的,二抗能抗一抗就行,你要染几种蛋白呢?

就染一种蛋白 另外一种是一个合成的荧光分子  想做个双染
3楼2014-04-30 19:20:18
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinc650 at 2014-04-30 19:20:18
就染一种蛋白 另外一种是一个合成的荧光分子  想做个双染...

荧光分子我不懂,只做过抗体的

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4楼2014-04-30 19:34:39
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zinc650

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-04-30 19:34:39
荧光分子我不懂,只做过抗体的
...

亲 你有空帮看下我的那几个网址呗 实在看得我头大 我只是想看看荧光分子染的位置是不是和抗体一样的
5楼2014-04-30 21:18:18
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

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5楼: Originally posted by zinc650 at 2014-04-30 21:18:18
亲 你有空帮看下我的那几个网址呗 实在看得我头大 我只是想看看荧光分子染的位置是不是和抗体一样的...

荧光分子偶真的不懂啊,我帮你看看抗体那个吧

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6楼2014-04-30 21:34:56
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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7楼2014-04-30 21:37:00
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zinc650

铜虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-04-30 21:37:00
几个抗体只是抗原决定簇不同,对于你的要求,哪个都可以做免疫荧光,随便选个有现货的就行了
...

谢谢亲哈  五一快乐  继续追问一下 如果是贴壁细胞做免疫荧光时可不可以直接铺在confocal皿里啊? 可是固定的话肯定会漂起来吧? 如果一直保持在冰上 可不可以不用固定啊
8楼2014-05-03 13:44:18
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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8楼: Originally posted by zinc650 at 2014-05-03 13:44:18
谢谢亲哈  五一快乐  继续追问一下 如果是贴壁细胞做免疫荧光时可不可以直接铺在confocal皿里啊? 可是固定的话肯定会漂起来吧? 如果一直保持在冰上 可不可以不用固定啊...

不会漂,会贴的更牢固(⊙o⊙)哦,祝实验顺利!!!

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9楼2014-05-03 13:47:07
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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zinc650: 金币+51, ★★★★★最佳答案, pat pat 谢谢啦 2014-05-03 16:18:07
引用回帖:
8楼: Originally posted by zinc650 at 2014-05-03 13:44:18
谢谢亲哈  五一快乐  继续追问一下 如果是贴壁细胞做免疫荧光时可不可以直接铺在confocal皿里啊? 可是固定的话肯定会漂起来吧? 如果一直保持在冰上 可不可以不用固定啊...

木有金币(⊙o⊙)哦,好桑心的(⊙o⊙)哦!!

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10楼2014-05-03 13:47:55
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