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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于大肠杆菌涂板（含氨苄）培养的问题
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我是蛋壳儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by meng_xu at 2014-04-29 08:03:42
从你的描述中看，板子应该没有问题，而且感受态没有污染，之前转化的菌涂板子，应该长大片的菌，没有问题，只是你转化的效率可能太低，卫星菌落一般都没有什么东西，如果就4-5个菌落，建议把中心的菌落挑过夜培养， ...

请问为什么之前转化成功的菌涂板会有大片的菌，就像没涂氨苄一样？
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11楼2014-04-29 13:15:53
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 我是蛋壳儿 at 2014-04-29 13:15:53
请问为什么之前转化成功的菌涂板会有大片的菌，就像没涂氨苄一样？...

之前转化成功的菌都是带有抗性的，你在有正确抗性板子上图，跟普通LB板子一样，当然都是大片的菌落了。
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12楼2014-05-02 06:53:18
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KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
我是蛋壳儿: 金币+1, ★有帮助, 后来发现确实是转化出现了问题 2014-05-04 20:00:00
是不是转化感受态的时候出了什么问题，导致转化效率很低。
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13楼2014-05-02 17:55:01
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-05-03 10:58:08
我是蛋壳儿: 金币+1, ★有帮助, 谢谢，后来重新转化的就比较正常了。 2014-05-04 20:01:31
你说的现象说明你做的很成功啊  有微卫星 说明你以前那个成功转化的质粒好或者是你转化加多了。。。没有AMP的都长是对的  你新做的转化长了四五个斑说明转化效率低 但是是正常的啊 。。。。
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借口很贱，，，
14楼2014-05-02 18:24:51
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我是蛋壳儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-02 06:53:18
之前转化成功的菌都是带有抗性的，你在有正确抗性板子上图，跟普通LB板子一样，当然都是大片的菌落了。...

可是当时刚转化完涂板以后长的菌落并没有这么多，会不会后来这些菌都不是正常的菌了
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15楼2014-05-04 21:21:45
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 我是蛋壳儿 at 2014-05-04 21:21:45
可是当时刚转化完涂板以后长的菌落并没有这么多，会不会后来这些菌都不是正常的菌了...

你刚转化完的当然没有这样多，所以有个东西教转化效率啊，没有问题
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16楼2014-05-05 00:24:53
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我是蛋壳儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-05 00:24:53
你刚转化完的当然没有这样多，所以有个东西教转化效率啊，没有问题...

可是我的这个转化成功的菌是同一次转化的，转化效率不应该有变化吧
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17楼2014-05-05 19:34:37
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 我是蛋壳儿 at 2014-05-05 19:34:37
可是我的这个转化成功的菌是同一次转化的，转化效率不应该有变化吧...

质粒和链接产物的效率，差的太多了，质粒10^9的效率，链接产物可能也就10^4-5吧
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18楼2014-05-06 04:39:18
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我是蛋壳儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-06 04:39:18
质粒和链接产物的效率，差的太多了，质粒10^9的效率，链接产物可能也就10^4-5吧...

我这个转化成功的是连接产物转化的
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19楼2014-05-06 22:21:58
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
你不是3个amp的板子么？其中2号不是涂的之前转化成功的么？连接是3号，对吧？
因为之前转化成功的菌，现在含有的就是质粒，每个细胞内都是有抗性的。
2号的菌落数应该远远大于3号，这个是没有问题的。

还是我理解你的问题有偏差，呵呵，都糊涂了
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我是蛋壳儿
20楼2014-05-07 03:21:59
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