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hmy313

铜虫 (初入文坛)

[求助] MTT实验,96孔板染菌 已有7人参与

做MTT实验,细胞在培养瓶里面没有染菌,接种到96孔板里配有培养会染菌。96孔板最外圈加了PBS。
无菌操作台紫外灭菌30min以上,通风10min。96孔板都是新的。
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sxdt151

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hmy313: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-05-20 22:11:17
不可将培养液滴至孔外,容易染菌

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
坚持
5楼2014-05-01 11:10:48
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普通回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-04-25 17:11:53
hmy313: 金币+5, 有帮助 2014-04-27 18:06:09
后期加入的所有试剂都有带菌风险。可以一一排除
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2014-04-25 15:38:19
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hmy313

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dhd997 at 2014-04-25 15:38:19
后期加入的所有试剂都有带菌风险。可以一一排除

MTT加了4小时以后就测OD值,也有风险吗?
之前用的东西现在在用,目前没有发现菌。
想问下,96孔板有什么操作规范吗?
3楼2014-04-27 18:07:56
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weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

MTT加完3小时就测,四小时容易染菌
4楼2014-04-27 20:46:58
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暮云深

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主的操作呢?是不是再操作过程中不经意被污染了?还有你的PBS确定是无菌的吗/?距离上次高压的时间是多少?个人愚见
6楼2014-05-04 19:43:27
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
hmy313: 金币+5, 有帮助 2014-05-09 22:41:16
枪头灭过菌了吗?你后期加药诱导也有可能引入细菌吧,不知道你的药是不是在超净台用灭菌水配的。我师姐跟我讲MTT实验很容易染菌,所以所有的东西最好在使用前都再过滤一遍。
7楼2014-05-06 20:42:29
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hmy313

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 20:42:29
枪头灭过菌了吗?你后期加药诱导也有可能引入细菌吧,不知道你的药是不是在超净台用灭菌水配的。我师姐跟我讲MTT实验很容易染菌,所以所有的东西最好在使用前都再过滤一遍。

枪头什么的都灭菌了,药也过膜虑菌了。
8楼2014-05-09 22:42:20
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hmy313

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sxdt151 at 2014-05-01 11:10:48
不可将培养液滴至孔外,容易染菌

有时候会滴到孔外耶,但是最后不都是用盖子盖上吗?
9楼2014-05-20 22:12:09
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CacaoPie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你认为染菌是不是因为96孔板中的液体的颜色变黑,如果是只有control组没有染菌,那应该是你加的药物有菌,如果都染菌那你就得检查下是不是你的培养基等共用的试剂的问题,如果只有几个孔染菌,那可能是你操作的原因。
10楼2014-05-21 22:04:04
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