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sxjcstt

新虫 (初入文坛)

[交流] 纤维素酶纯化用凝胶层析G75,我用缓冲溶液洗脱pH值应该怎么确定呢?

纤维素酶纯化用凝胶层析G75,我用缓冲溶液洗脱pH值应该怎么确定呢?我第一次做凝胶,完全不懂
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xiaoamuchong

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
sxjcstt: 金币+1 2014-04-22 18:36:02
sxjcstt: 金币+1 2014-05-17 15:46:58
在一定pH值下,使蛋白质带负电,凝胶带正电,两者就可以结合在一起。这时候降低pH就可以使之洗脱。对于纤维素酶可以考虑用0.05mol/L、pH4.8的柠檬酸--柠檬酸钠缓冲溶液洗脱。希望对你有帮助。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2014-04-22 17:44:00
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sxjcstt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-04-22 17:44:00
在一定pH值下,使蛋白质带负电,凝胶带正电,两者就可以结合在一起。这时候降低pH就可以使之洗脱。对于纤维素酶可以考虑用0.05mol/L、pH4.8的柠檬酸--柠檬酸钠缓冲溶液洗脱。希望对你有帮助。

谢谢啊,我想问的是G75的胶和G100的胶对pH值有没有影响
3楼2014-04-22 18:36:42
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by sxjcstt at 2014-04-22 18:36:42
谢谢啊,我想问的是G75的胶和G100的胶对pH值有没有影响...

G100与G75的区别只在于G100交联度小。对洗脱液pH值没有影响。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
4楼2014-04-22 18:57:02
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sxjcstt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-04-22 18:57:02
G100与G75的区别只在于G100交联度小。对洗脱液pH值没有影响。...

哦,好的,谢谢
5楼2014-04-22 19:43:44
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windmaple

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
凝胶层析与pH值没多大关系,就是分子筛。 pH与离子层析关系很大。
6楼2014-04-23 23:48:08
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dongjiqiao

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
凝胶层析只是和蛋白分子量有关吧,缓冲液既不能凝胶改变孔径大小,又不能改变蛋白分子量,所以,选能保持你酶活稳定的差不多的缓冲液就好了吧。
long,longlong.
7楼2014-06-20 11:25:47
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