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wangxuefeng1023木虫 (小有名气)
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做了一段时间的分生,有两个小问题请教一下各位战友,望不吝赐教: 1.构建正义质粒的时候,应该将CDS区全长插入到载体中,但是做PCR扩增的时候,有时设计的引物会在CDS区的两边稍微多一些碱基,这样是不是不会影响基因的表达?那么这些多余的碱基数达到多少的时候会影响该基因的表达呢? 2.构建反义质粒的时候,理论上是可以只将该基因CDS中的一部分序列反向插入载体中就可以了,那么这个“一部分"到底应该是多长呢?太短了是否会影响干预效果?到底多长才不会影响干预的效果呢? 希望各位战友帮我解答一下,谢谢! CDs是什么意思啊? |
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