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基因测序
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| 问一下,基因测序的时候使用的是多个细胞的混合物?扩增的是DNA双链还是单链?一般扩增多少倍?你们测得片段的序列后进行拼接吗? |
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我们一起: 金币+10, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2014-04-20 11:27:22
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扩增的DNA肯定是双链了 一般扩增25-35个循环吧,具体倍数没算过,估计是几十万倍以上。 sanger测序一般每个反应能测出500-800bp,看你的片段长度了,如果超过这个范围,可能需要测好几个反应,然后拼成全序列。另外sanger测序都是前500bp准确性比较高,后面的准确性会稍微降低点。假如你有个1200bp的产物,可以从两头各测800bp,然后靠中间重复的400bp来将序列拼完整,这样得到的序列非常准确。 |
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