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疯狂伊文

木虫 (正式写手)

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[求助] 求助，构建作物重组自交系的详细方案已有2人参与

如题，谢谢大家了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

回复此楼

1楼 2014-04-19 02:39:53

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nwsuafliu

木虫 (著名写手)

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专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

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木虫/panda: 金币+15, 农林EPI+1, 应助指数+1, 感谢虫友细心的解答，很专业！ 2014-04-23 21:08:34
疯狂伊文: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 谢谢，还有就是父母本杂交组合的量怎么确定？我做小麦，大概200到300的群体。那组合最少需要多少组？ 2014-04-23 21:16:42

重组自交系（Recombinant inbred lines, RILs）是双亲杂交后，通过单粒传法（Single seed descend method，SSD），子代经过多代自交得到的稳定遗传群体。RILs是开展遗传分析、基因定位和克隆、以及选育种的重要群体材料，在动植物上得到广泛应用。RILs的构建，对于作物来说，比动物简单很多。因为作物可以套袋自交，很容易得到大量子代。而动物不能自交得到大量后代，必须通过姊妹交的办法克服这一障碍。
以自花授粉作物和单子叶模式植物水稻（Oryza sativa L）为例，RILs的构建可以分解成以下步骤。
Step　1：　种植双亲P1和P2。如果双亲生育期差别较大，可以根据需要进行分期播种，以确保花期有效相遇。在抽穗期开展杂交试验，可以P1 x P2，或者P2 x P1。授粉后约35天，收取F1种子。
Step　2：　种植F1植株，以母本为对照，判断F1杂种的真伪，拔除假杂种。必要时可以结合分子标记鉴定F1植株的真实性。抽穗时，对F1真杂种进行严格套袋，防串粉，成熟时混合收取F1植株上的F2种子。
Step　3：　种植F2植株（200-300株），抽穗时进行主穗套袋。成熟时，每个单株收取1个主穗。
Step　4：　播种来自F2植株的主穗（即F3种子）, 不要脱粒，直接穗播。从每个穗发芽的幼苗中，留取1苗，种植F3群体（200-300株）。
Step　5：　连续穗播多代。到F7代，将群体放大，种植成家系（200-300个家系），固定编号。并按家系收种。到此，RILs构建完成。可以用于QTL mapping。
以后的每一代就可以按家系收种，不再进行穗播。群体的大小完全根据你的试验需要而定。一般200-300个家系的RILs群体完全满足基因初定位的需要。但如果用于选育种，则需要不少于1500个家系，以保留更多的变异组合类型。