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疯狂伊文

木虫 (正式写手)

[求助] 求助,构建作物重组自交系的详细方案 已有2人参与

如题,谢谢大家了。

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呀陈

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nwsuafliu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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木虫/panda: 金币+15, 农林EPI+1, 应助指数+1, 感谢虫友细心的解答,很专业! 2014-04-23 21:08:34
疯狂伊文: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 谢谢,还有就是父母本杂交组合的量怎么确定?我做小麦,大概200到300的群体。那组合最少需要多少组? 2014-04-23 21:16:42
重组自交系(Recombinant inbred lines, RILs)是双亲杂交后,通过单粒传法(Single seed descend method,SSD),子代经过多代自交得到的稳定遗传群体。RILs是开展遗传分析、基因定位和克隆、以及选育种的重要群体材料,在动植物上得到广泛应用。RILs的构建,对于作物来说,比动物简单很多。因为作物可以套袋自交,很容易得到大量子代。而动物不能自交得到大量后代,必须通过姊妹交的办法克服这一障碍。
以自花授粉作物和单子叶模式植物水稻(Oryza sativa L)为例,RILs的构建可以分解成以下步骤。
Step 1:  种植双亲P1和P2。如果双亲生育期差别较大,可以根据需要进行分期播种,以确保花期有效相遇。在抽穗期开展杂交试验,可以P1 x P2,或者P2 x P1。授粉后约35天,收取F1种子。
Step 2:  种植F1植株,以母本为对照,判断F1杂种的真伪,拔除假杂种。必要时可以结合分子标记鉴定F1植株的真实性。抽穗时,对F1真杂种进行严格套袋,防串粉,成熟时混合收取F1植株上的F2种子。
Step 3:  种植F2植株(200-300株),抽穗时进行主穗套袋。成熟时,每个单株收取1个主穗。
Step 4:  播种来自F2植株的主穗(即F3种子),  不要脱粒,直接穗播。从每个穗发芽的幼苗中,留取1苗,种植F3群体(200-300株)。
Step 5:  连续穗播多代。到F7代,将群体放大,种植成家系(200-300个家系),固定编号。并按家系收种。到此,RILs构建完成。可以用于QTL mapping。
以后的每一代就可以按家系收种,不再进行穗播。群体的大小完全根据你的试验需要而定。一般200-300个家系的RILs群体完全满足基因初定位的需要。但如果用于选育种,则需要不少于1500个家系,以保留更多的变异组合类型。
知识改变命运
3楼2014-04-23 09:32:40
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userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
疯狂伊文: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2014-04-19 13:27:10
2楼2014-04-19 07:23:24
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