24小时热门版块排行榜    

查看: 2708  |  回复: 22

Mornchen

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
增大目的条带的量 减少载体 胶回收后不要用EB洗脱 尝试用水洗脱
11楼2014-04-19 22:10:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxliu

金虫 (小有名气)

TA还是T4
12楼2014-04-20 21:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝索道人

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
单酶切可以尝试用乙醇沉淀,还有可以去磷酸,尝试一下吧
努力就有收获!
13楼2014-04-21 09:07:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by yushijiang30 at 2014-04-19 17:34:29
你好,怎么回收的能到50的,我今天酶切了3管目的基因,50微升体系的,然后都加到一个过滤柱里,结果测出来的浓度才10几纳克每微升?...

呵呵,这要看你的目的片段是多大的了,一般小于700的片段回收率较低,对于小片段,只能多做几关,起码要5管
14楼2014-04-21 11:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

引用回帖:
8楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-04-19 17:22:10
比例是不是说的摩尔比?和体积比怎么换算过来?最近也一直在构建载体
...

纳克每微升
15楼2014-04-21 11:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

r-rainbow

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不长菌可能是载体浓度不够 加40~50ng左右
16楼2014-04-21 16:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lairongpeng

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-12 18:49:28
引用回帖:
3楼: Originally posted by yushijiang30 at 2014-04-18 15:43:20
感受态是刚买的,应该没问题,你看看我的目的片段跑胶是不是有点暗啊,35纳克/微升少不少?...

回收后35已经很高了,我做的3ng/ul都可以。你可以调节一下插入片段和载体的比例(我一般用1:4或者1:6)请你谷歌“ligation calculator” 然后按照它的计算来加样

[ 发自小木虫客户端 ]
17楼2014-04-22 13:30:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eileen8519

金虫 (小有名气)

可能是插入片段和载体比例不对,调整一下试试,我以前也遇到过。
18楼2014-04-22 15:51:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

邱玉信

禁虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2014-07-16 15:31:11
本帖内容被屏蔽

19楼2014-06-12 11:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duowan17

金虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-16 15:31:53
我也觉得是你载体浓度的问题,不过11000bp说实话一点都不大。你可以大提质粒一次,然后酶切回收得到足够量的回收片段,应该是很好连的。
20楼2014-06-12 14:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yushijiang30 的主题更新
信息提示
请填处理意见