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蓝枫101

铁虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by libaitre at 2014-05-08 11:17:45
可以说下用的是什么引物吗？

用的polf polR
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11楼2014-05-08 13:39:32
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蓝枫101

铁虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by ccdeweidao at 2014-04-25 09:09:19
你这胶的一半都没跑到，可以先试试40-50%，我做的条件是先200V 5min,然后再80V 16-20h。效果还不错...

我查找相关文献，引物用的不一样 梯度大部分都是40到60
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12楼2014-05-08 13:57:42
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libaitre

金虫 (初入文坛)
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11楼: Originally posted by 蓝枫101 at 2014-05-08 13:39:32
用的polf polR...

这个引物没用过，多少bp的？
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13楼2014-05-08 14:09:18
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蓝枫101

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by libaitre at 2014-05-08 14:09:18
这个引物没用过，多少bp的？...

做的是固氮基因 。pcr跑出来是340bp
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14楼2014-05-08 14:49:38
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ccdeweidao

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 蓝枫101 at 2014-05-08 13:57:42
我查找相关文献，引物用的不一样 梯度大部分都是40到60...

梯度得根据自己的实际情况进行调整呀，一般都是看看胶跑的位置进行调整，开始设定一个大的范围，然后看看胶大概在哪个浓度范围，再进行缩小。
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15楼2014-05-09 09:40:12
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蓝枫101

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by ccdeweidao at 2014-05-09 09:40:12
梯度得根据自己的实际情况进行调整呀，一般都是看看胶跑的位置进行调整，开始设定一个大的范围，然后看看胶大概在哪个浓度范围，再进行缩小。...

这是我跑的图
DGGE
dgge 2014.4.11.JPG
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16楼2014-05-09 11:10:49
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libaitre

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 蓝枫101 at 2014-05-08 14:49:38
做的是固氮基因 。pcr跑出来是340bp...

根据我做DDGE的经验，300多bp的80V是不是就够了呢？我用的是伯乐公司的电泳系统。北京六一的电泳仪。
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17楼2014-05-12 17:34:39
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