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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于NEB和TAKARA的T4多聚核苷酸磷酸化效率问题，困扰许久了，谢谢
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liuyil

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-22 02:21:42
这么久了你还没有做上？
什么事情都有个效率问题，不然我们讨论半天都是废话，annealing确实在水中就可以进行，但是绝对不是annealing的最佳条件。...

磷酸化已经做了几天了，不过没法检测是否磷酸化，也没有检测退火是否成功，只有做了连接才能看到，现在正在准备做连接，十多个小片段的连接，用的是invitrogen 的T4连接酶，5U/ul。
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未来不知道会怎么样，做好当下最重要。
11楼2014-04-23 12:54:03
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1066479423

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-18 09:35:26
你注意到了一个现象，但是没有把问题搞清楚。
第一个问题是T4PNK的单位定义，也就是这个酶，1U能干啥。T4PNK的能力是很强的，不管什么公司，1U T4PNK的催化能力都是在nmol级别的，所有多少pmol的产物，不在话下。
...

您好，Ci/mol和TBq/mmol这种单位是什么意思？是怎么换算的？这个反应的话能用二钠盐形式的ATP吗？期待大神的回复，谢谢
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12楼2014-11-10 14:47:55
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