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ITC等温滴定实验相关问题----------------------------求助
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求助： 最近想做蛋白与小分子物质之间的等温滴定实验，但是，查资料发现，ITC所需的蛋白浓度在几十μM到几mM之间，但是，我纯化后的目的蛋白浓度仅仅只有0.02μM左右，距离要求差了100倍左右了。想请问做过ITC的或者高效表达过外源蛋白的虫友，你们是如何获得这么高浓度的蛋白的。 补充：我是用大肠杆菌作为表达菌种，PET系列为载体，使用Ni-His标签的蛋白纯化试剂盒纯化得到目的蛋白的，所以，这种方法获得的蛋白是小量的，在20ml左右，所以，采用透析的方法不行。 |
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