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xuzhongrui88

新虫 (小有名气)

[求助] 转基因植物纯合鉴定

在做转基因时候,有个样品只得到了两个T1代株系,且后代分离比都为15:1 ,是双位点插入,不知道要怎么样筛选纯合,按照常用的方法T1代选择后代分离比为3:1的,继续往下筛一代,不再发生性状分离的就为纯合,但是如果是双位点插入,再往下筛选下去,即使后代不发生分离,也有可能是一个位点是纯合AA,另一个位点是杂合Aa,这样貌似无法选出纯合植株。查阅文献发现可以用Real-Time PCR或者Tail-PCR鉴定,但是貌似都比较麻烦,请问还有其他方法吗? 还有就是Real-Time PCR这个方法可信度高吗,感觉找到的几篇文章都不是很权威的杂志,最初貌似是发表在Plant science上的
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xuzhongrui88: 金币+30, ★有帮助 2014-04-16 17:54:24
可以考虑用定量PCR

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-15 22:25:32
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xuzhongrui88

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-15 22:25:32
可以考虑用定量PCR

这个方法可靠吗?感觉用这个方法的文章都不是很高端
3楼2014-04-16 17:55:43
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Neo2000

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhongrui88 at 2014-04-16 17:55:43
这个方法可靠吗?感觉用这个方法的文章都不是很高端...

可行啊,用的人多了就不上档次了吗嘛

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-04-16 18:52:48
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