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小胖怂

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细胞污染 已有3人参与

细胞最近长得十分缓慢,查资料之后,初步判断为少量的细菌污染。实验室的这个细胞不多了,不想丢掉,还有没有别的方法处理?
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我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
培养细胞最重要的就是超净台、培养液。就在这两方面入手解决。培养液是最适培养液吗?不是的话现用的确定可以吗?一般染菌的话得二天就会出现大量白色沉淀,你的有这么严重?支原体感染是(肉眼和显微镜)看不出的,但是会使细胞增殖受影响。生长变慢也有可能是培养液PH不对等等。要处理细菌污染可以加抗生素--原来有双抗的可以加庆大霉素等,可以用配置培养液用双抗的浓度的十倍浓度抗生素冲击一夜,第二天换液到理论浓度。支原体处理起来就麻烦了(一般都有支原体污染,只是没有影响细胞而已)。
为爱而生
2楼2014-04-15 16:57:26
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小胖怂

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-04-15 16:57:26
培养细胞最重要的就是超净台、培养液。就在这两方面入手解决。培养液是最适培养液吗?不是的话现用的确定可以吗?一般染菌的话得二天就会出现大量白色沉淀,你的有这么严重?支原体感染是(肉眼和显微镜)看不出的, ...

之前一直使用这个培养液的,长得很好。
我的培养液只是有些浑浊,吸出来后闻了闻,有臭味,细胞增值也受到影响了,所以判断为细菌污染。
如果之前的培养液内未加入双抗,直接加入双抗可以吗?
3楼2014-04-15 17:07:40
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pumaatlarge

禁虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
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4楼2014-04-15 17:09:59
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小胖怂

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by pumaatlarge at 2014-04-15 17:09:59
换新的培养基,胰酶,PBS等;

然后加双抗处理。一般没有什么少量的细菌污染,细菌污染就全污染,细胞生长缓慢也可能感染了支原体。

如果感染了支原体,还可以挽救吗?
5楼2014-04-15 17:12:26
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我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小胖怂 at 2014-04-15 17:07:40
之前一直使用这个培养液的,长得很好。
我的培养液只是有些浑浊,吸出来后闻了闻,有臭味,细胞增值也受到影响了,所以判断为细菌污染。
如果之前的培养液内未加入双抗,直接加入双抗可以吗?...

应该是可以的,不过用多大量我就不知道了。
为爱而生
6楼2014-04-15 17:50:39
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
使用支原体清除试剂,或者支原体抑制试剂。选择生物类的,抗生素毕竟会对细胞有一定的毒性,细胞对抗生素也会有一定的依赖性。可以联系我,我们单独探讨。
7楼2014-04-16 09:58:29
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