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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌培养 质粒提取后困惑
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nbzhenzhen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wakasasa at 2014-06-12 09:45:45
亲，你做RNA，提质粒干嘛？

我们需要定量细菌16S rRNA基因，也就是16S rDNA。是定量DNA的。
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11楼2014-06-19 11:38:24
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wakasasa

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by nbzhenzhen at 2014-06-19 11:38:24
我们需要定量细菌16S rRNA基因，也就是16S rDNA。是定量DNA的。...

长知识了，谢谢
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445566
12楼2014-06-20 14:45:40
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

单酶切一下，最后会有一条带就行。    质粒的形态多，不用执着于此。
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13楼2014-06-20 16:06:28
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nbzhenzhen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-20 16:06:28
单酶切一下，最后会有一条带就行。    质粒的形态多，不用执着于此。

嗯，谢谢。我后来决定重新培养提取质粒，就没有这样的状况了。
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14楼2014-06-23 21:45:06
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2014-04-15 18:42:47
这是正常现象，你确定你问的那些人说不知道？！据了解，其实远不止3条带，
但是，一般情况下，看到两条活着三个是没问题的。。。
如果感兴趣，你可以查一下关于质粒的具体介绍。。。

请问，总是提取到 基因组DNA  不是质粒DNA  是为什么呢？  采用 碱法提取？
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12
15楼2014-06-27 08:26:49
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-06-27 08:26:49
请问，总是提取到 基因组DNA  不是质粒DNA  是为什么呢？  采用 碱法提取？...

这个问题好像我有点印象  应该是提质粒时菌液富集次数别太多 一般提一个质粒用4ml之内的菌液足够。
这样好像就可以避免基因组DNA，具体我记不太清了。
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16楼2014-07-10 14:28:27
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涯天一方

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这也很正常的，会形成超螺旋。我最近做的也是有这种情况
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17楼2017-08-20 20:03:30
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